[发明专利]数字微流控芯片及基于其的病原体免疫检测方法

说明书

本发明涉及微流控芯片技术领域，具体涉及一种数字微流控芯片及基于其的病原体免疫检测方法，包括如下步骤：(1)制作数字微流控芯片；所述数字微流控芯片包括上样孔、形成试剂储池的试剂电极、形成液滴运行通道的输运电极以及形成检测区的检测电极；(2)在所述数字微流控芯片的检测区修饰抗原；(3)加入样本并运行数字微流控芯片，通过荧光检测系统CCD拍照检测荧光信号并进行定量分析。该数字微流控芯片及基于其的病原体免疫检测方法，反应时间短，检测灵敏度高，外围设备简单，灵活性强，能耗低；能够满足社区医院、远程诊疗等场合的需求，适于构建便携式分析平台；既可以批量分析，也可以分析单个样本，对样本量的适应性强。

技术领域

本发明涉及微流控芯片技术领域，具体涉及一种数字微流控芯片及基于其的病原体免疫检测方法。

背景技术

免疫检测是目前临床检测中最重要的检测手段之一，应用于疾病诊断、病原体筛查、药物检测等方面，在环境监测、食品安全等领域也有广泛应用。上世纪80年代以来，自动化检测技术的引进与改进，使得自动化、高通量免疫分析成为可能，大大促进了免疫检测技术的应用推广。

目前的自动化免疫检测仪器存在操作繁琐、反应缓慢、耗时长、试剂及样品消耗量大、检测成本高等缺点。同时，检测设备结构复杂、依赖高精密制造技术、价格昂贵、体积庞大，需要经培训的专业人员进行操作。此外，目前的自动化免疫检测仪器主要为批量化检测而设计，多数仪器只提供2-3个应急检测通道，灵活性差，不适宜零星样本的检测。随着床边检测(point-of-care)、家庭健康检测(Home health tests)、远程诊断(tele-diagnosis)等概念的提出，以及社区医院的发展，现有的自动化免疫检测仪器已不能满足现代医疗发展模式的需求。而以胶体金技术为代表的试纸条检测，虽然使用方便，但其检测目标有限且检测灵敏度较低，检测效果有限。

发明内容

本发明为了解决上述技术问题，提供了一种数字微流控芯片及基于其的病原体免疫检测方法，反应时间短，检测灵敏度高，成本低。

为了达到上述技术效果，本发明包括以下技术方案：第一方面，本发明提供了一种病原体免疫检测方法，包括如下步骤：

(1)制作数字微流控芯片：所述数字微流控芯片包括上样孔、形成试剂储池的试剂电极、形成液滴运行通道的输运电极以及形成检测区的检测电极；

(2)在所述数字微流控芯片的检测区修饰抗原；

(3)加入样本并运行数字微流控芯片，通过荧光检测系统CCD拍照检测荧光信号并进行定量分析。

进一步地，所述制作数字微流控芯片的具体步骤包括：

步骤1：制作下层微流控芯片：

(1)在基底上设置电极层；所述电极层包括形成试剂储池的试剂电极、形成液滴运行通道的输运电极以及形成检测区的检测电极；

(2)所述电极层上设置SiO₂绝缘层；

步骤2：制作上层微流控芯片：

(1)所述上层微流控芯片采用ITO导电玻璃，在所述ITO导电玻璃上开设有上样孔，所述上样孔与所述液滴运行通道相通；

(2)所述上层微流控芯片上设置试剂储池口，所述试剂储池口和试剂电极共同形成试剂储池；

步骤3：将所述上层微流控芯片和下层微流控芯片上下叠合在一起。

所述在所述数字微流控芯片的检测区修饰抗原，包括：

(1)采用多层微纳加工技术，在检测电极上的绝缘层表面沉积金膜，并利用湿法刻蚀技术进行图案化；

(2)在沉积有金膜的检测电极上包被抗原。