[发明专利]增强羊栖菜多糖生物活性的方法

权利要求书

1.增强羊栖菜多糖生物活性的方法，其特征是包括以下步骤：

1）、降解：

先将羊栖菜粗多糖溶于pH为6.0的缓冲溶液，接着加入由果胶酶和糖化酶组成的复合酶，再加入缓冲溶液进行稀释，所得的体系中羊栖菜粗多糖的浓度为4.0mg/mL、复合酶总浓度为68.4U/mL；所述果胶酶：糖化酶的活力比=3.3:1；

将所述体系于54.2℃的温度下振荡反应3h ，从而实现对羊栖菜粗多糖的降解；

2）、将步骤1）所得的反应液除酶后过滤，所得滤液浓缩至原体积的20~30%；用截留分子量为3500 Da的透析袋透析24~48 h，将所得的透析液浓缩，冷冻干燥，得到羊栖菜复合酶解多糖ESFP。

2.根据权利要求1所述的增强羊栖菜多糖生物活性的方法，其特征是：

所述pH为6.0的缓冲溶液是pH为6.0的乙酸-乙酸钠缓冲溶液、柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液。

3.根据权利要求1或2所述的增强羊栖菜多糖生物活性的方法，其特征是：将羊栖菜复合酶解多糖ESFP进行分离纯化；包括以下步骤：

①、粗分：

选用Cellulose DEAE-52层析柱；

称取400±40mg羊栖菜复合酶解多糖ESFP，溶于7 mL的去离子水中离心取上清液，将上清液均匀的加入到层析柱填料上表面，依次用去离子水、以及浓度分别为0.1 mol/L、0.3mol/L、0.5 mol/L、0.8 mol/L的NaCl溶液洗脱，流速为1 mL/min，

分别收集0.1 mol/L、0.3 mol/L、0.5 mol/L、0.8 mol/L的NaCl溶液这4种洗脱剂各自对应的洗脱液，减压浓缩、透析脱盐、冷冻干燥，从而对应得到羊栖菜复合酶解多糖的DEAE-52的四种初步纯化的多糖组分；

②、细分：

选用Sephadex G-100凝胶色谱柱；

将以上经过Cellulose DEAE-52粗分的四种初步纯化的多糖组分分别进行以下操作：

称取100±10 mg初步纯化的多糖组分溶于3 mL去离子水中，离心取上清液，加样于Sephadex G-100凝胶色谱柱中，用去离子水洗脱，流速为0.20 mL/min，合并多糖洗脱液，减压浓缩、冷冻干燥得到羊栖菜复合酶解多糖的四个纯化组分，分别命名为ESFP1、ESFP2、ESFP3和ESFP4。

4.如权利要求1或2所述方法制备而得的羊栖菜复合酶解多糖ESFP或者如权利要求3所述方法制备而得的纯化组分在制备功能性食品基料中的应用。