[发明专利]一种角膜炎动物模型制备方法及应用

说明书

一种角膜炎动物模型制备方法及应用，属于动物模型技术领域。一种角膜炎动物模型制备方法包括通过牵拉兔眼球下缘外直肌与下直肌之间的筋膜形成开口，清除或牵引障碍物后使三叉神经眼支可见，分离三叉神经眼支周围筋膜使三叉神经眼支暴露，将NaOH溶液转移到暴露的三叉神经眼支中。本申请通过牵拉兔眼球下缘外直肌与下直肌之间的筋膜形成开口，避免了开颅的损伤较大、并发症多的问题，手术时间短，术后无需缝合，伤口愈合时间短，伤口感染几率小，模型更具有损伤的一致性。此外本申请还涉及角膜炎动物模型制备方法得到的角膜炎动物模型在筛选治疗神经营养性角膜炎药物中的应用。

技术领域

本申请涉及一种动物模型技术领域，且特别涉及一种角膜炎动物模型制备方法及应用。

背景技术

三叉神经眼支的分布于人类及其他动物(如大小鼠，猴，犬)差异较大，临床上有多种疾病因三叉神经眼支损伤引发，神经营养性角膜炎属于其中一种。

常用小鼠制作三叉神经眼支损伤模型，以开颅的方式暴露三叉神经眼支，采用电击的方式损伤三叉神经。该方法涉及开颅，并损伤了颅脑，对动物脑部损伤大，且并发症多(如颅内压变化)，术后需要缝合，伤口愈合时间长，术后护理程序繁琐，伤口感染几率大，手术时间长，且模型一致性差，损伤程度不一，采用小鼠制作模型，动物低等，不利于药效评价。

发明内容

本申请实施例提供一种角膜炎动物模型制备方法及应用。以改善小鼠三叉神经眼支损伤模型制作的手术复杂、并发症其他因素多的问题。

本申请第一方面提供一种角膜炎动物模型制备方法，其包括：

通过牵拉兔眼球下缘外直肌与下直肌之间的筋膜形成开口，清除或牵引障碍物后使三叉神经眼支可见，分离三叉神经眼支周围筋膜使三叉神经眼支暴露，将NaOH溶液转移到暴露的三叉神经眼支中。

在上述技术方案中，采用兔做角膜炎动物模型，相较于用小鼠做角膜炎动物模型，小鼠低等，不利于药效评价，兔的眼睛与人体更接近。本申请通过牵拉兔眼球下缘外直肌与下直肌之间的筋膜形成开口，清除或牵引障碍物后使三叉神经眼支可见，避免了开颅的损伤较大、并发症多的问题，手术时间短，手术创伤小，术后无需缝合，伤口愈合时间短，术后护理简单，伤口感染几率小。且本方法选择的开口位置及分离路线最为接近三叉神经眼支且避开了大部分血管，操作熟练后手术全过程可实现无任何出血，减少了压迫，水肿，出血等症状造成的神经损伤，使模型更具有损伤的一致性。

本申请通过将NaOH溶液转移到暴露的三叉神经眼支中，制成兔三叉神经眼支化学药剂灼烧损伤模型。化学损伤避免了钳夹损伤力度难以恒定，避免了定量撞击损伤范围较大，避免了光损伤范围不可衡量，完成损伤可定量的模型制作，使模型一致性更高。

在前述第一方面的一些实施例中，通过牵拉兔眼球下缘外直肌与下直肌之间的筋膜之前，先麻醉兔。

本实施例中，在制备角膜炎动物模型中，为了确保模型制备顺利进行，避免兔受到刺激挣扎或应激反应，先麻醉兔再开始制备模型。

在前述第一方面的一些实施例中，采用麻醉剂麻醉兔；

可选地，采用戊巴比妥钠溶液静脉注射麻醉兔；

可选地，戊巴比妥钠溶液的质量分数为0.08～0.12％，戊巴比妥钠溶液的注射量以兔的质量为标准，为1.8～2.2mL/kg。

本实施例中，采用戊巴比妥钠溶液静脉注射麻醉兔，麻醉起效快，选择戊巴比妥钠溶液的浓度和用量能够更好地达到动物模型制作所需的麻醉效果。

在前述第一方面的一些实施例中，清除或牵引障碍物包括依次进行的牵引泪腺和向视神经方向钝性分离。

本实施例中，牵拉兔眼球下缘外直肌与下直肌之间的筋膜形成开口后，开口与三叉神经眼支之间还有障碍物挡住视线，通过将开口与三叉神经眼支之间的泪腺牵引至别处，不再挡住视线，以及向视神经方向钝性分离，才能看到三叉神经眼支。