[发明专利]一种纤维二糖差向异构酶突变体及其在产乳果糖中的应用

权利要求书

1.一种纤维二糖差向异构酶突变体，其特征在于，为SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。

2.编码权利要求1所述纤维二糖差向异构酶突变体的基因。

3.含权利要求2所述基因的载体。

4.一种重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，表达权利要求1所述纤维二糖差向异构酶突变体。

5.如权利要求4所述的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，以枯草芽孢杆菌CCTCC NO:M2016536为表达宿主。

6.一种生产纤维二糖差向异构酶的方法，其特征在于，应用了权利要求4或5所述的重组枯草芽孢杆菌进行发酵。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，挑取重组枯草芽孢杆菌单菌落接种到LB培养基中，35-39℃、200-220rpm，培养8-10h；将培养液按5-10％的接种量接种到TB培养基中，先于35-39℃、200-220rpm，培养1.5-3h，当菌体OD₆₀₀在0.5-1.0时转至30-34℃、200-220rpm进行摇瓶诱导发酵45-50h，发酵液经超声破碎后离心，上清即为重组纤维二糖差向异构酶。

8.一种生产乳果糖的方法，其特征在于，以乳糖为底物，以权利要求1所述纤维二糖差向异构酶突变体或权利要求4所述的重组枯草芽孢杆菌或权利要求5所述的重组枯草芽孢杆菌为催化剂。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，初始反应温度为75-82℃，起始pH为7.0-7.5，乳糖浓度为350-450g/L，加酶量控制为15-25U/mL反应体系；温度为75-82℃、转速140-160r/min，反应1-4h。

10.权利要求1所述纤维二糖差向异构酶突变体或权利要求4所述的重组枯草芽孢杆菌或权利要求5所述的重组枯草芽孢杆菌在食品、饲料或制药领域中的应用。