[发明专利]一种蜂蜜中果糖含量的检测方法

说明书

本发明公开了一种蜂蜜中果糖含量的检测方法，该方法为：以苯硼酸衍生物3‑喹啉‑硼酸为荧光探针加入到稀释后的蜂蜜溶液中，对该蜂蜜溶液进行荧光检测，以316nm的光源作为激发波长，测量400nm处的荧光强度，对荧光强度和果糖含量进行最小二乘法线性拟合计算，得到果糖含量。本发明与传统的果糖含量测量方法相比，具有灵敏度高、选择性好、样品无需预处理、低成本、检测快速等优点。

技术领域

本发明属于食品快速检测技术领域，尤其涉及一种以苯硼酸衍生物3-喹啉-硼酸(3QBA)为荧光探针对蜂蜜中果糖含量进行检测的方法。

背景技术

蜂蜜是蜜蜂采集花朵中的花蜜或植物的分泌物，经蜜蜂使用特殊物质的加工、酿造、混合并储存于蜂巢中的一种甜蜜物质。蜂蜜具有丰富的营养物质，对人们益处很大，深受人们喜爱。蜂蜜中碳水化合物由葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖等糖类物质组成，果糖在蜂蜜中的含量在37.8％到41.3％之间，由于蜂蜜具有独特的风味和营养价值，蜂蜜有着巨大的市场空间和利润，因此，蜂蜜掺假是目前市场上比较突出的问题，掺假蜂蜜不利于人体健康，通过检测蜂蜜中果糖含量有助于判断蜂蜜是否掺假。高效液相法是检测果糖含量的最常见方法，该类方法测量结果准确可靠，检测限和定量检测限非常低，二者的值可以分别达0.07mg/L和0.22mg/L。分光度法也是检测果糖的常用方法，该种方法需要用化学试剂将果糖转化为吸光度和果糖浓度成线性关系的反应产物，常用的试剂有新铜试剂、二硝基水杨酸等。但上述方法都存在需要配备专业的操作人员、样品的前处理比较复杂、检测时间长和检测费用高等缺点。

研究快速、低成本、高效的检测果糖的方法是目前食品安全领域研究的热点，一些果糖生物传感器采用类似循环伏安法的检测设备，在果糖脱氢酶的催化作用下，果糖分子被工作介质氧化，失去H⁺，生成5-酮-D-果糖，同时，处于还原态的工作介质在两电极之间电压的作用下被氧化，失去电子，传感器的工作电流和果糖浓度成线性关系，工作介质有锇聚合物、聚酰胺-胺树状大分子等。

近几年来，荧光探针因其灵敏度高、选择性好、样品无需预处理、低成本、检测快速等优点而备受关注，可用于氨基酸检测、DNA检测、金属离子检测、疾病预测等方面的检测。喹啉-硼酸作为糖类识别功能起步较早，有文献报导了8-喹啉-硼酸(8QBA)、5-喹啉-硼酸(5QBA)和3-喹啉-硼酸(3QBA)对糖类的识别能力和识别机制。利用苯硼酸衍生物对蜂蜜中果糖含量测定的方法尚未见报导，相关检测技术并没有得到突破性的应用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种以苯硼酸衍生物3-喹啉-硼酸(3QBA)为荧光探针对蜂蜜中果糖含量进行检测的方法，旨在解决上述背景技术中现有技术的不足。

本发明是这样实现的，一种蜂蜜中果糖含量的检测方法，该方法为：以苯硼酸衍生物3-喹啉-硼酸(3QBA)为荧光探针加入到稀释后的蜂蜜溶液中，对该蜂蜜溶液进行荧光检测，以316nm的光源作为激发波长，测量400nm处的荧光强度，对荧光强度和果糖含量进行最小二乘法线性拟合计算，得到果糖含量。

优选地，所述荧光探针的浓度为3.6mg/L，配制时需要通氩气至少30分钟以上，使得400nm处的荧光产生淬灭；

所述对荧光强度和果糖含量进行最小二乘法线性拟合具体为：选取果糖浓度分别10mg/L、20mg/L、30mg/L、40mg/L、50mg/L的水溶液作为标准溶液，分别测量其对应的荧光强度，荧光强度和果糖含量进行最小二乘法线性拟合。

优选地，所述最小二乘法线性拟合的计算函数为：

I₄₀₀＝4.211×10³x+1.673×10⁵；

上式中，I₄₀₀为400nm处的荧光强度，x为果糖含量，单位为mg/L。

优选地，所述蜂蜜的浓度应低于125mg/L。