[发明专利]枸杞多糖提取分离和纯化方法、枸杞糖肽及制备方法在审
申请号: | 201910021848.5 | 申请日: | 2019-01-10 |
公开(公告)号: | CN109608557A | 公开(公告)日: | 2019-04-12 |
发明(设计)人: | 滕鑫 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;C07K1/14;A61K9/20;A61K9/48;A61K38/14;A61P35/00 |
代理公司: | 重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙) 50230 | 代理人: | 包晓静 |
地址: | 200237 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 枸杞多糖 枸杞糖肽 荷瘤小鼠 提取分离 制备 诱导肿瘤细胞 抗肿瘤作用 酸性杂多糖 调控方式 腹腔积液 免疫能力 遗传损伤 造血功能 肿瘤细胞 复合性 实体瘤 抑制率 凋亡 多肽 糖肽 免疫力 衰老 蛋白质 生长 | ||
1.一种枸杞多糖提取分离和纯化方法,其特征在于,所述枸杞多糖提取分离和纯化方法包括以下步骤:
步骤一:收获后,枸杞果实经干燥处理,备用;
步骤二:干果碎粉用氯仿:甲醇=2:1混合物回流,在80℃中用80%乙醇回流提取低聚糖和小分子;用石油醚在90℃下得到低聚糖;
步骤三:在亚临界条件下,使用加压水结合超声辅助处理得到低聚糖,在100℃下用5mPa压力和26mL×g·1的液固比,在超声功率下53分钟,得到粗LBP;
步骤四:根据不同的方法对粗LBP提取物进行去蛋白处理;
步骤五:采用亲和性和反相高效液相色谱(RPHPLC)的组合对产品进行纯化,纯化后将获得的过滤浓缩的水提取物加入四体积95%乙醇,沉淀多糖组分;
步骤六:利用无水乙醇和丙酮洗涤,将过滤的粗LBP沉淀冻干并储存。
2.如权利要求1所述的枸杞多糖提取分离和纯化方法,其特征在于,所述步骤二中,将超声波80W与纤维素酶56℃结合,培养时间20分钟后在进行处理。
3.如权利要求1所述的枸杞多糖提取分离和纯化方法,其特征在于,所述步骤四中,粗LBP提取物采用酶解、SEVAG法或三嵌段共聚物盐双水相萃取和透析膜方法进行去蛋白处理;
所述步骤五中,沉淀多糖组分在4℃下过夜培养。
4.如权利要求1所述的枸杞多糖提取分离和纯化方法,其特征在于,所述步骤六中,冷冻时间为90小时以上;
所述步骤六中,用无水乙醇和丙酮洗涤后,将过滤的粗LBP沉淀冻干并储存,然后采用热风干燥、真空干燥和喷雾干燥进行处理粗品LBP。
5.一种由权利要求1所述枸杞多糖提取分离和纯化方法得到的枸杞多糖,其特征在于,所述枸杞多糖分离纯化得到枸杞糖肽;
所述枸杞多糖分子质量为1.524×105,由阿拉伯糖、鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖6种中性单糖和半乳糖醛酸及18种氨基酸组成。
6.如权利要求5所述的枸杞多糖,其特征在于,所述枸杞多糖是酸性杂多糖同多肽或蛋白质构成的复合性多糖;存在Glycan-O-Ser的糖肽结构。
7.一种包含权利要求5所述枸杞糖肽的抗肿瘤药物。
8.一种如权利要求7所述抗肿瘤药物的制备方法,其特征在于,所述抗肿瘤药物的制备方法包括:将药物按照10g/100ml的浓度和注射用水配置,按照动物的体重100mg/kg通过静脉注射给药。
9.一种由权利要求5所述枸杞糖肽制备的抗肿瘤胶囊。
10.一种由权利要求5所述枸杞糖肽制备的抗肿瘤片剂。
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