[发明专利]一种抗肿瘤化合物的制备方法及其应用有效
| 申请号： | 201910011187.8 | 申请日： | 2019-01-07 |
| 公开（公告）号： | CN109652468B | 公开（公告）日： | 2020-08-25 |
| 发明（设计）人： | 洪葵;田二丽;邓子新 | 申请（专利权）人： | 武汉大学 |
| 主分类号： | C12P7/22 | 分类号： | C12P7/22;A61K31/085;A61P35/00;C07C43/23;C12R1/465 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 彭劲松 |
| 地址： | 430072 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 肿瘤 化合物 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种利用红树林链霉菌219807制备对三联苯类化合物BTH-II0204-207:B的方法，所述BTH-II0204-207:B的结构式见式Ⅰ，准分子离子峰m/z 293.1173(计算值[M+H]+293.1099)，分子式为C19H16O3，其特征在于，所述的化合物BTH-II0204-207:B是从红树林链霉菌219807的发酵培养物中制备得到，所述的红树林链霉菌219807是来源于中国海南省三亚红树林土壤，保藏编号为CCTCC NO.M2015276，
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
(1)将红树林链霉菌219807经固体培养基活化后接种于ISP2液体培养基中进行培养，培养条件为28℃、220r/min振荡培养3d，之后以10％的接种量接种到DO培养基中，在28℃、220r/min振荡条件下培养8d；DO培养基的配方为：葡萄糖10g/L，糊精25g/L，燕麦粉20g/L，棉籽饼粉10g/L，鱼粉5g/L，酵母提取物2g/L，CaCO3 3g/L，pH值为6.0；
(2)将步骤(1)所得的发酵液利用离心的方法使得固液分离，菌丝体部分用丙酮超声破壁三次，将合并的提取液减压浓缩至不含丙酮后，用乙酸乙酯进行萃取三次，浓缩得到菌丝体部分的粗提物；
(3)将步骤(2)获得的粗提物在正相硅胶柱层析中以环己烷和丙酮为洗脱液进行梯度洗脱，比例依次为环己烷：丙酮＝9:1、7:1、5:1、3:1、7:3、3:2、1:1、2:3、1:3、1:5，每个梯度洗脱体积为1.5L，共获得十个洗脱组分，分别减压浓缩；
(4)将步骤(3)获得的洗脱比例为环己烷：丙酮＝7:1部分的浓缩浸膏再进行正相硅胶柱层析的分离，洗脱液为石油醚：乙酸乙酯＝9:1、8:2、7:3、6:4、1:1、4:6、1:9，共获得七个洗脱组分，分别减压浓缩；
(5)将步骤(4)获得的洗脱比例为石油醚：乙酸乙酯＝8:2部分的浓缩浸膏经C18反相色谱柱进行高效液相(HPLC)的分离纯化，半制备条件为等度CH3CN:H2O＝65:35，流速3.0mL/min，在10.48min时得到BTH-II0204-207:B的单体化合物。
3.权利要求1所述的方法中的红树林链霉菌219807在制备对三联苯类化合物BTH-II0204-207:B中的应用。
4.权利要求1所述的方法中的对三联苯类化合物BTH-II0204-207:B在制备抗肿瘤药物中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的抗肿瘤药物为抗乳腺癌、肝癌、口腔表皮样癌的药物。
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