[发明专利]鲍鱼肽PIR及其合成方法与应用在审
| 申请号: | 201910008607.7 | 申请日: | 2019-01-04 |
| 公开(公告)号: | CN109627288A | 公开(公告)日: | 2019-04-16 |
| 发明(设计)人: | 杨赛;鲍隆 | 申请(专利权)人: | 鲍隆;杨赛 |
| 主分类号: | C07K7/08 | 分类号: | C07K7/08;C07K1/04;C07K1/06;A23K50/80;A23K20/147;A23L33/18;A61K38/10;A61P31/04 |
| 代理公司: | 北京鼎佳达知识产权代理事务所(普通合伙) 11348 | 代理人: | 候蔚寰 |
| 地址: | 山东省烟*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 鲍鱼 合成 应用 固相多肽合成法 免疫能力 应激力 肽粗品 研发 应激 免疫力 制备 保健品 养殖业 | ||
1.一种鲍鱼肽PIR,其特征在于,所述鲍鱼肽PIR的序列为:GDLADGVGEGALDEAGLLAV。
2.权利要求1所述鲍鱼肽PIR的合成方法,其特征在于,根据Fmoc-固相多肽合成法合成鲍鱼肽。
3.根据权利要求2所述鲍鱼肽PIR的合成方法,其特征在于,所述Fmoc-固相多肽合成法中,以王氏树脂为固相载体,依次以二甲基氨基吡啶DMAP\DIC及HOBT\TBTU\DIEA为催化剂;二甲基甲酰胺DMF为溶剂和清洗剂,以三氟乙酸TFA、茴香硫醚Thioanisole和H2O为切割试剂,进行所述鲍鱼肽的合成。
4.根据权利要求2或3所述鲍鱼肽PIR的合成方法,其特征在于,所述Fmoc-固相多肽合成法中,依次使用Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Asp(otBu)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Asp(otBu)-OH Fmoc-Gly-OH作为合成氨基酸来分别将Gly、Asp、Leu、Ala、Asp、Gly偶联到肽链上,按照肽序列依次连接,直至最后一个氨基酸Val的连接。
5.根据权利要求2-4任一项所述鲍鱼肽PIR的合成方法,其特征在于,所述Fmoc-固相多肽合成的步骤如下:
1)用DCM浸泡王氏树脂1h-5h,以将其活化;
2)根据Fmoc-固相多肽合成法,以王氏树脂为固相载体,连接第一个氨基酸到树脂;
3)加入哌啶脱去Fmoc-基团,使第一个氨基酸的氨基游离出来,恢复反应活性;
4)以HOBT\TBTU\DIEA为催化剂,DMF为溶剂及清洗剂,进一步连接第二个氨基酸;
5)以同样方法连接其他的氨基酸,连接完所有氨基酸后洗涤并用氮气将树脂吹干;
6)用切割试剂将肽从树脂上切割下来;经后处理即得。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤3)中所述哌啶以20%哌啶的DMF溶液加入。
7.根据权利要求5或6所述的方法,其特征在于,步骤4)中所述的催化剂为质量比1:1:1-1:5:5的HOBT\TBTU\DIEA;
和/或,步骤6)所述切割试剂为体积比为80:1:1-20:1:1的TFA、Thioanisole和H2O的混合液。
8.根据权利要求5或6所述的方法,其特征在于,步骤3~5)中,还包括以茚三酮对树脂进行显色检测的步骤,优选所述茚三酮以5%茚三酮的无水乙醇溶液的形式提供。
9.根据权利要求5-8任一项所述鲍鱼肽PIR的合成方法,其特征在于,所述方法还包括使用C18柱对所述经后处理得到的粗品多肽进行纯化。
10.权利要求1所述的鲍鱼肽PIR或权利要求2-9中任一项所述合成方法制备得到的鲍鱼肽PIR在养殖业、保健品及药品中的应用;所述养殖业优选为对虾养殖。
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