[发明专利]选择益生菌的方法

说明书

本发明整体涉及益生菌，具体地涉及能够生物转化橄榄多酚的益生菌。本发明涉及一种选择益生菌菌株或益生菌菌株混合物的方法。本发明的另外方面包括益生菌菌株用于提高橄榄多酚的生物功效的用途以及包含用于增强橄榄苦苷的治疗效果和/或预防效果的益生菌菌株的组合物。

技术领域

本发明整体涉及益生菌，具体地涉及能够生物转化橄榄多酚的益生菌。本发明涉及一种选择益生菌菌株或益生菌菌株混合物的方法。本发明的另外方面包括益生菌菌株或益生菌菌株混合物用于提高橄榄多酚的功效的用途以及包含用于增强橄榄苦苷的治疗效果和/或预防效果的益生菌菌株或益生菌菌株混合物的组合物。

背景技术

橄榄苦苷是存在于属于木犀科的植物尤其是油橄榄(Olea europaea)的果实、根部、树干中并且更具体地叶片中的多酚。本发明人注意到，橄榄苦苷代谢物羟基酪醇在软骨细胞代谢方面产生的体外数据获得明显的阳性结果，与橄榄苦苷相比，其显示出更高功效。不受理论的约束，基于文献，本发明人认为羟基酪醇的化学结构表明羟基酪醇具有比橄榄苦苷更高的生物利用率。再次不受理论的约束，本发明人进一步认为，一剂橄榄苦苷的一部分可在肠的较上部分按原样被吸收并且另一部分可到达结肠，在结肠中它在生物转化成羟基酪醇和/或中间代谢物诸如橄榄苦苷苷元或羟基酪醇乙酸酯后被大部分吸收。

增强橄榄苦苷代谢物在结肠处的吸收可提高橄榄苦苷的生物利用率，从而潜在提高橄榄苦苷的功效。就这一点而言，橄榄苦苷与一种或多种具有糖苷酶活性和/或酯酶活性的益生菌的共同施用可增加此益生菌在结肠中的存在，使橄榄苦苷原位降解，以便优化其代谢物的吸收和随后的效果。

已经提出了将植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)菌株B21用于去除橄榄的苦味[Marsilio等人，J.Sci.Food Agric.76,520-524(1998)(《食物农业科技杂志》，第76期，第520-524页，1998年)]，其中显示其可降解橄榄苦苷。然而，发酵过程耗时约5天，这远远长于实际的消化时间范围，因此，植物乳杆菌菌株B21将无法提供合适的益生菌以与橄榄苦苷共同施用来增强生物利用率和/或生物功效。

本领域显然需要找到改善的方法来鉴定益生菌的，具体地讲，能够提高橄榄多酚诸如橄榄苦苷的生物利用率和/或生物功效的益生菌。

不能将本说明书中对现有技术文献中的任何参考视为承认此类现有技术为众所周知的技术或形成本领域普遍常识的一部分。如本说明书中所用，词语“包括”、“包含”和类似词语不应理解为具有排他性或穷举性的含义。换句话讲，这些词语旨在意指“包括，但不限于”。

发明内容

本发明的目的是改善现有技术，并且提供针对益生菌鉴定问题的改善解决方案，或至少提供有用的替代方法。

本发明的目的通过独立权利要求的主题实现。从属权利要求进一步拓展本发明的构想。

因此，本发明在第一方面提供了一种选择益生菌菌株或益生菌菌株混合物的方法，该方法包括以下步骤：

a.通过计算机分析来鉴定具有β-葡糖苷酶编码基因的益生菌菌株，

和/或通过体外分析多个菌株来鉴定具有β-葡糖苷酶活性的益生菌菌株；

b.通过计算机分析来鉴定具有酯酶编码基因的益生菌菌株，和/或通过体外分析多个菌株来鉴定具有酯酶活性的益生菌菌株；

c.将橄榄苦苷与i)在步骤a中被鉴定为具有β-葡糖苷酶活性的益生菌菌株和在步骤b中被鉴定为具有酯酶活性的益生菌菌株的细菌培养物、或ii)在步骤a和步骤b中被鉴定为具有β-葡糖苷酶活性和酯酶活性两者的益生菌菌株的细菌培养物一起发酵；

d.鉴定在步骤c的发酵期间形成的代谢物是否包含羟基酪醇乙酸酯、羟基酪醇或榄香醇酸；

e.测量在步骤c中作为发酵时间函数而剩余的橄榄苦苷的比例；以及