[发明专利]用于增加蛋白产量的细胞系和方法在审
| 申请号： | 201880063290.0 | 申请日： | 2018-10-02 |
| 公开（公告）号： | CN111148835A | 公开（公告）日： | 2020-05-12 |
| 发明（设计）人： | R.罗特;L.迈尔 | 申请（专利权）人： | 阿斯利康（瑞典）有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N15/113;C12N15/63 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 郭慧;梅黎 |
| 地址： | 瑞典南*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 增加 蛋白 产量 细胞系 方法 | ||
1.一种分离的细胞，在该分离的细胞中，ULK1基因的表达产物的作用已受到削弱。
2.如权利要求1所述的分离的细胞，其中该分离的细胞是真核细胞。
3.如权利要求2所述的分离的细胞，其中该真核细胞是哺乳动物细胞。
4.如权利要求3所述的分离的细胞，其中该哺乳动物细胞是人胚肾(HEK)细胞或中国仓鼠卵巢(CHO)细胞。
5.如权利要求1-4中任一项所述的分离的细胞，其中该ULK1基因的表达产物的作用已通过突变或编辑该分离的细胞中的该ULK1基因而受到削弱。
6.如权利要求5所述的分离的细胞，其中该突变或编辑消除了或削弱了该ULK1基因的表达产物的一个或多个催化残基，或经翻译后修饰的该ULK1基因的表达产物的一个或多个残基，或者产生了显性负突变。
7.如权利要求5所述的分离的细胞，其中该突变或编辑减少了该细胞中该ULK1基因的表达或敲除了该ULK1基因。
8.如权利要求1-4中任一项所述的分离的细胞，其中该ULK1基因的表达产物的作用已通过转录后基因干扰而受到削弱。
9.如权利要求8所述的分离的细胞，其中该转录后基因干扰利用siRNA干扰、微RNA干扰、反义RNA干扰或小分子干扰。
10.如权利要求1-9中任一项所述的分离的细胞，其中与其中该ULK1基因的表达产物的作用未受到削弱的细胞相比，该ULK1基因的表达产物的作用的削弱会导致重组蛋白的产量的增加。
11.如权利要求10所述的分离的细胞，其中该重组蛋白是分泌蛋白、膜锚定蛋白或细胞内蛋白。
12.如权利要求10-11中任一项所述的分离的细胞，其中该重组蛋白是抗体。
13.如权利要求10-12中任一项所述的分离的细胞，其中该重组蛋白的产量的增加为至少约30％。
14.如权利要求13所述的分离的细胞，其中该重组蛋白的产量的增加为约50％至约500％。
15.一种产生重组蛋白的方法，该方法包括：
a.将编码该重组蛋白的重组基因引入其中ULK1基因的表达产物的作用已受到削弱的分离的细胞中；
b.在允许该重组蛋白表达的条件下培养该分离的细胞；以及
c.如果该重组蛋白由该分离的细胞分泌，则从该分离的细胞或从培养基中分离该重组蛋白。
16.如权利要求15所述的方法，其中该分离的细胞是真核细胞。
17.如权利要求16所述的方法，其中该真核细胞是哺乳动物细胞。
18.如权利要求17所述的方法，其中该哺乳动物细胞是人胚肾(HEK)细胞或中国仓鼠卵巢(CHO)细胞。
19.如权利要求15-18中任一项所述的方法，其中该ULK1基因的表达产物的作用已通过突变或编辑该分离的细胞中的该ULK1基因而受到削弱。
20.如权利要求19所述的方法，其中该突变或编辑消除了或削弱了该ULK1基因的表达产物的一个或多个催化残基，或经翻译后修饰的该ULK1基因的表达产物的一个或多个残基，或者产生了显性负突变。
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