[发明专利]组织因子靶向CAR-NK和CAR-T细胞疗法

说明书

公开了与识别组织因子(TF)的嵌合抗原受体(CAR)有关的方法和组合物。具体地，公开了包含fVII或其功能片段的CAR。还公开了包含本文公开的CAR的免疫效应细胞。

相关申请的交叉引用

本申请要求2017年9月27日提交的美国临时申请号62/564,006的权益，该临时申请通过引用其全部内容并入本文。

背景技术

组织因子(TF)是跨膜糖蛋白，是凝血级联的主要引发剂。在正常的生理条件下，活性TF不与血液接触。在血管损伤期间，暴露于内皮下TF和胶原的血液中会导致凝血因子和血小板的激活，随后导致止血栓子形成。在各种临床环境中不恰当地诱导TF表达可导致危及生命的血栓形成和/或导致病理学并发症。斑块破裂后的TF暴露被认为是导致急性心肌梗死和中风的血栓性闭塞的原因。在这些情况下，由凝血因子激活的促炎信号通路也导致水肿形成和梗死面积增加。与血管成形术相关的血管损伤导致平滑肌细胞(SMC)上的TF上调，这被认为会诱导与再狭窄相关的细胞信号通路。TF在癌症和革兰氏阴性脓毒症中的过度表达导致危及生命的血栓形成和炎性途径的激活。

TF是病理性血管生成的调节剂。体内研究表明，TF在体内也是一种独特的病理性血管生成性血管内皮细胞(VEC)表面受体，因为它在来自患者或动物模型的肿瘤脉管系统(Contrino等人，1996；Folkman等人，1996；Hu等人，1999；Hu等人，2001；Cheng等人，2011；Duanmu等人，2011)、眼睛(Bora等人，2003)和异位(Krikun等人，2010)新血管系统中在体内血管生成VEC上具有选择性表达。血管内皮生长因子(VEGF)在血管生成依赖性癌症和非恶性人类疾病(Ferrara等人，2002)，例如黄斑变性(Klagsbrun等人，1987)，类风湿关节炎(Afuwape等人，2002)和子宫内膜异位(Fujimoto等人，1999)中起关键作用。具体地，在那些血管生成依赖性疾病中，VEGF通过与在病理性新血管系统(通常是微血管或毛细血管)中，VEC上的VEGR受体结合来刺激血管生成(Hu等人，Angiogenesis2016)。使用VEGF诱导的体外血管生成性血管内皮模型，结果表明TF是一种血管生成特异性受体，是因子VII靶向治疗的靶标(Hu等人，Angiogenesis 2016)，表明TF靶向剂可能对治疗癌症(实体癌和白血病)、湿性与年龄有关的黄斑变性(AMD)、子宫内膜异位和类风湿关节炎具有治疗潜力。

TF是癌细胞、癌症干细胞(CSC)(Hu等人，Oncotarget 2016)和实体癌中的肿瘤血管内皮细胞的共同的(至今仍是特定的)生物标志物和治疗靶标。TF在这些癌细胞中高度表达(乳腺癌中80％-100％，肺癌中40％-80％，卵巢癌中84％)。这三种类型的癌症不仅难以控制，而且还是美国和世界范围内死亡的主要原因，并且经常形成基于CSC的对化学疗法和放射疗法的抗药性(Vidal等人，2014；Moncharmont等人，2012；Koch等人，2010)。除乳腺癌、肺癌和卵巢癌外，TF在许多其他人类实体癌、白血病、肉瘤、骨髓瘤和潜在淋巴瘤中也以高百分比表达(表1)，例如，原发性黑素瘤中95％，转移性黑素瘤中100％，胰腺癌中53％-90％，结直肠癌中57％-100％，肝细胞癌中63％-100％，原发性和转移性前列腺癌中60％-78％，神经胶质瘤中47％-75％(Hu.Antibodies 2018)。最近，研究表明，TF在乳腺癌、肺癌、卵巢癌以及潜在的其他实体癌(例如头颈癌)中由癌症干细胞表达，并且TF靶向剂可以根除那些TF表达的癌症干细胞而无耐药性(Hu等人，Oncotarget 2016)。

研究还表明，TF是由脉络膜新血管系统(CNV)表达的，它是AMD在实验动物中的模型(Bora等人，2003)。还已经表明，TF在子宫内膜异位病变中由血管生成性血管内皮细胞表达。