[发明专利]用于核酸序列分析的具有反应性表面的流动池在审
| 申请号: | 201880060500.0 | 申请日: | 2018-09-17 |
| 公开(公告)号: | CN111108200A | 公开(公告)日: | 2020-05-05 |
| 发明(设计)人: | 方晔;J·G·林;孙伟;魏莹 | 申请(专利权)人: | 康宁股份有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/6874;G01N35/00;G01N35/08;G01N35/10 |
| 代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 张璐;项丹 |
| 地址: | 美国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 核酸 序列 分析 具有 反应 表面 流动 | ||
1.一种流动池制品,其包括:
腔室;和
腔室的至少一个表面,其包括:
具有反应性表面的固体基材,其包括:
共价附接于固体基材的偶联剂;
共价附接于偶联剂的式(I)的聚合物;
所述聚合物具有以下中的至少一种:多个马来酸酐反应性基团(m),多个经反应的基团(n),或者(m)和(n)的混合物,其中
X是二价NH、O或S;
R是H,取代或未取代的、直链或支链烷基,低聚(环氧乙烷)、低聚(乙二醇)、或二烷基胺;
R’是已经与马来酸酐共聚的第一不饱和单体的残基;马来酸酐反应性基团与经反应的基团的相对比值(m:n)为0.5至10;
m为1至10,000,并且n为0至9,500;和
共价附接于聚合物的核酸探针。
2.如权利要求1所述的制品,其中,核酸探针是胺封端的核酸,或胺封端的核酸的混合物。
3.如权利要求1或2所述的制品,其中,固体基材是玻璃、玻璃陶瓷、硅、熔凝二氧化硅或石英。
4.如权利要求1-3中任一项所述的制品,其中,核酸探针分子的密度是每平方微米表面积为1至500,000个探针分子。
5.如权利要求1-4中任一项所述的制品,其中,偶联剂是硅烷、倍半硅氧烷或其混合物。
6.如权利要求5所述的制品,其中硅烷是3-(氨基丙基)三乙氧基硅烷,并且倍半硅氧烷是氨基丙基倍半硅氧烷。
7.一种制造如权利要求1-6中任一项所述的制品的方法,其包括:
使固体基材与偶联剂接触,以使偶联剂共价附接于固体基材而形成经偶联剂改性的固体基材;
使经偶联剂改性的固体基材与式(I)的聚合物接触以将所述聚合物共价附接于经偶联剂改性的固体基材,从而形成经聚合物和偶联剂改性的固体基材;以及
使经聚合物和偶联剂改性的固体基材与核酸探针接触以将核酸探针共价附接于经聚合物和偶联剂改性的固体基材,从而形成所述制品。
8.如权利要求7所述的方法,其中,固体基材为玻璃、玻璃陶瓷、硅、熔凝二氧化硅或石英。
9.如权利要求7或8所述的方法,其还包括:通过对聚合物与核酸探针的比值进行选择来控制核酸探针的密度。
10.如权利要求7-9中任一项所述的方法,在使经聚合物和偶联剂改性的固体基材与核酸探针接触的步骤中还包括调节小分子。
11.如权利要求10所述的方法,其中,调节小分子是乙醇胺、低聚乙二醇、聚乙二醇或其混合物。
12.如权利要求10或11所述的方法,其中,通过采用调节小分子与核酸探针的不同比值,调节小分子控制附接于聚合物的核酸探针的密度。
13.一种将如权利要求1所述的制品用于核酸序列分析的方法,所述方法包括:
使制品与潜在含有一种或多种核酸的样品接触,所述核酸具有与核酸探针互补的核酸序列。
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