[发明专利]用于结核病诊断的试剂盒和用于通过使用所述试剂盒来诊断结核病的方法

说明书

本发明涉及一种用于结核病诊断的试剂盒和一种用于使用所述试剂盒来检测结核病的方法，并且具体来说，本发明涉及一种用于同时诊断结核分枝杆菌和非结核性分枝杆菌的试剂盒，所述试剂盒包括：(a)能够同时和特异性扩增结核分枝杆菌特异性基因和普遍存在于分枝杆菌中的基因的引物；和(b)能够鉴定所扩增产物的探针；以及涉及一种用于使用所述试剂盒来同时诊断结核分枝杆菌和非结核性分枝杆菌的方法。

【技术领域】

本发明涉及一种用于结核病诊断的试剂盒和一种使用所述试剂盒来检测结核病的方法，更特别地，本发明涉及一种用于同时诊断结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)和非结核病分枝杆菌(mycobacteria)的试剂盒，所述试剂盒包括：(a)(i)能够同时和特异性扩增结核分枝杆菌特异性基因和分枝杆菌共有基因的引物；和(b)能够鉴定所扩增产物的探针；以及一种使用所述试剂盒来同时诊断结核分枝杆菌和非结核病分枝杆菌的方法。

【背景技术】

结核病不仅折磨肺，而且也折磨淋巴腺、肾、脊柱、腹膜、肠和皮肤。结核病是一种由结核分枝杆菌引起的疾病，并且显示各种症状，诸如发热、疲劳和重量减轻。尽管在各种医学技术方面取得进步，现今，由结核分枝杆菌引起的感染仍然频繁发生，并且特定来说，韩国在OECD国家中具有最高的结核病年发生率。

据估计对应于世界人口的三分之一约20亿人受结核分枝杆菌感染，并且据报道每年有900万人被新诊断有结核病，并且300万人死于结核病(TB)。在韩国，2006年的统计数据显示，全国242个健康中心以及私立医院和诊所被新诊断有结核病并接受治疗的患者的数目是35,000，也就是说每10万人中有67.2名患者。同时根据来自国家统计署(NationalStatistical Office)的死亡原因统计资料，2006年有2,948人死于结核病，这意味着结核病死亡率达到每100,000人中6.7人，占由感染性疾病所致的所有死亡的55.7％，因此，结核病是韩国在30个OECD成员国之中位居第一的一种极其严重疾病。为何结核病，这种已被视为在不发达国家发生的一种疾病新近已作为全球健康问题而出现，其主要原因是结核分枝杆菌在患有获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的患者中引起机会性感染，并且在国际社会中，各国由于全球化而频繁地进行彼此接触。

为防止结核病的蔓延，需要各种方法，包括早期诊断、施用适当的抗生素、对患者进行隔离、定期筛查具有高水平的结核病暴露的群体等，尤其是早期和快速诊断受HIV感染的患者，这在防止由结核病所致的死亡方面极其重要。用于诊断结核病的最常见方法包括X射线胸部检查和耐酸杆菌涂片(acid-fast bacilli smear)，但不能区分结核病分枝杆菌与非结核性分枝杆菌，因此诊断的准确性很低，即50％至75％，从而导致灵敏性和可靠性问题。由非结核性分枝杆菌引起的肺病表现出与结核病类似的症状和检查结果，诸如咳嗽和有痰，但不传播给其他人并具有完全不同于结核病的治疗方法，并且在美国和欧洲，结核病最终通过额外筛查来确定，即使最初的痰涂片测试呈阳性。然而，韩国被分类为非结核性分枝杆菌是罕见的区域，因此由于在对非结核性分枝杆菌进行二级检查方面的疏忽，受非结核性分枝杆菌感染的患者会被错误地诊断为患有结核病并接受结核病治疗，从而导致不利处境诸如由于传染性而受约束等。同时在越来越多的病例中，一些患者被错误地诊断为耐药性结核病，而耐药性结合病不能通过初级药物治愈，因此多年服用次级抗结核病药物，从而造成经济和精神损害。因此，即使初级痰涂片测试呈阳性，也需要诸如核酸扩增测试或培养测试的额外测试，但在所述培养测试的情况下，仅仅培养结核病分枝杆菌就要花费4至8周，因此难以进行快速诊断和对结核病分枝杆菌进行适当的早期治疗。考虑到这种情况，对于早期筛查结核病，理想的方法是抗酸杆菌(AFB)涂片和核酸扩增测试的组合检查是，并且其正在包括美国的发达国家中进行认证。

因为结核病具有诸如针对结核病的疗法具有副作用以及容易传播的问题，所以感染性细菌的早期诊断是治疗疾病的一个极其重要的因素。因此，各种诊断技术正在被积极地开发，并被应用于对结核病的早期诊断。