[发明专利]用于微生物裂解的半干珠磨方法及进行该方法的装置

权利要求书

1.同时以非周期运动和混沌运动方式摇动样品的装置，具有大约1cm至大约2.5cm的行程长度，大约0.2cm至大约1cm的行程高度，和大约5Hz至大约55Hz的速度。

2.权利要求1的装置，其中所述装置被设置成将样品容纳在一个或更多个微量滴定板、单独的微量离心管或者其他适合于低通量或高通量分析的容器中。

3.权利要求2的装置，其中所述微量滴定板选自由8、16、24、46、96、384或1536孔板组成的组。

4.权利要求2的装置，其中能够被同时处理的微量离心管的数量范围为从1到96。

5.用于裂解样品中的生物细胞以从所述细胞中释放DNA的方法，包括以下的连续步骤：

(a)将含有生物细胞的第一水溶液或非水溶液与(i)具有大约2毫米至大约10毫米直径的球和(ii)具有大约20微米至大约150微米直径的珠混合，以形成半干饼；

(b)将(a)的混合物以非周期和混沌运动的方式摇动一段时间，所述时间能有效地从所述细胞中释放DNA；

(c)将所述半干饼用第二水溶液洗涤，以溶解和/或悬浮包括DNA在内的细胞内含物；

(d)通过使所述珠沉降，并回收含有步骤(b)中释放的DNA和其他细胞成分的上清液，从而将所述第二水溶液与固体组分分离。

6.权利要求4的方法，其中所述第一溶液是(i)选自由水、生物缓冲液或另一种含水物质(another aqueous)组成的组的水溶液或(ii)足以形成半干饼的非水溶液。

7.权利要求5的方法，其中所述第一水溶液中所述生物细胞的容量是所述珠和所述第一水溶液的总重量的大约20％。

8.权利要求5的方法，其中所述球具有大约4.5毫米的直径。

9.权利要求5的方法，其中所述球由莫氏硬度等级为4或更高的材料制成。

10.权利要求9的方法，其中所述材料是钢。

11.权利要求5的方法，其中所述珠具有大约20微米至大约150微米的直径。

12.权利要求11的方法，其中所述珠具有大约100微米的直径。

13.权利要求5的方法，其中所述珠由莫氏硬度等级为4或更高的材料制成。

14.权利要求13的方法，其中所述材料是玻璃。

15.权利要求5的方法，其中将所述珠以所述生物细胞和所述第一水溶液的总重量的大约80％的浓度加入到所述第一水溶液中。

16.权利要求5的方法，其中步骤(b)中的所述摇动进行大约5秒至大约10分钟的一段时间。

17.权利要求16的方法，其中所述摇动进行2分钟。

18.权利要求5的方法，其中步骤(b)中从细胞释放的所述DNA通过选自由铽荧光、OD₂₆₀测量、嵌入染料荧光、终点或实时PCR检验或其任意组合组成的组的方法测量。

19.权利要求5的方法，其中所述分离通过选自由离心、过滤和重力沉降组成的组的方法进行。