[发明专利]生物芯片用基体、生物芯片、生物芯片的制造方法及其保存方法

说明书

本发明的目的在于提供生物芯片用基体、生物芯片、生物芯片的制造方法及其保存方法。本发明涉及生物芯片及其制造方法，该生物芯片具有基体和被固定化物质的点，所述基体具有亲水性的反应区域，所述被固定化物质的点包含配置于上述反应区域的生物物质，上述反应区域由能将液体保持于其内侧的边界包围，上述点进一步包含增粘剂和/或表面活性剂。

技术领域

本发明涉及利用固定于基体的生物物质等而用于生化反应的检测或分析等的生物芯片、用于生物芯片的基体、生物芯片的制造方法和生物芯片的保存方法，特别涉及用于过敏原检查、肿瘤标志物检查等的利用抗原抗体反应的检查诊断用芯片。

背景技术

近年来，已经广泛使用将抗体或抗原固定化于板上的用于免疫测定的酶标板、将核酸固定化于芯片上的DNA芯片等。这些芯片中将作为被固定化物质的蛋白质、核酸等的生物物质以点状在基体表面固定化成微阵列状。

作为将蛋白质等固定化于基体上的方法，公开了如下方法：将BSA点样到在丙烯酸树脂基板上涂布聚乙二醇部分子量350的聚乙二醇单甲基丙烯酸酯的乙烯基聚合物而得到的聚合物层，并利用基于4,4’-二叠氮二苯乙烯-2,2’-二磺酸钠的光交联反应将BSA固定化于基板(专利文献1)；将N-[4-[3-(三氟甲基)-3H-双吖丙啶-3-基]苯基]环氧乙烷和肽点样于在丙烯酸树脂基板上涂布聚乙二醇部分子量350的聚乙二醇单甲基丙烯酸酯的乙烯基聚合物而得到的膜将肽固定化(专利文献2)。

另一方面，作为进行生化反应的检测、分析的方法，公开了如下方法：利用8-AOT和SSMCC将马来酰亚胺基以点状导入于键合于蒸镀有铬和金的载玻片的PEG₃-OH烷硫醇，介由该马来酰亚胺基使肽排列成点状而固定化，利用由此而得的阵列使检测试样流入于SPR装置，从而进行cSrc激酶的磷酸化检测(专利文献3)。

专利文献4中公开了如下方法：对涂覆有钻石/类金刚石碳的硅制或不锈钢制的微小的芯片进行活化处理，向其上点样过敏原后，使残留于芯片上的未反应基团失活，进而用BSA封闭，然后与检测试样反应。

作为能够用少量的检测试样进行检测的芯片，公开了一种能够实现多个检测试样的解析或少量检测试样的反应的芯片，其在基材中具备多个反应室(孔)、与各上述孔连接的流路和用于向上述流路注入溶液的注入口(专利文献5)。另外，公开有一种芯片，具备：配置于可收容液态检测试样的收容部的、固定有与检测对象的成分反应的成分的点以及利用离心力将检测试样和清洗液排出的排液部以及分离部(专利文献6)。

另外，将蛋白质固定化于板上的蛋白质芯片等一般是由DNA芯片延伸而进行开发的，因此在进行在玻璃基板上将蛋白质或捕捉蛋白质的分子等(被固定化物质)固定化于芯片表面的研究(专利文献7)。

在将被固定化物质固定化于基板上后，使其在该表面上与其它生理活性物质(被检测物质：蛋白质、抗原等)反应，进而使被标志的蛋白质反应，最终用检测器等进行检测的情况下，如果在未固定有捕捉分子的部分固定除该分子以外的被检测物质，则在检测时成为噪声，成为使信噪比(S/N比)降低的原因，使检测精度降低。特别是在用于临床诊断等的血清、血浆中，夹杂蛋白质的非特异性吸附多，会出现较高的噪声，处于S/N比变低的趋势。

因此，将抗体固定化于芯片表面后，为了防止抗原和二次抗体的非特异性吸附而进行非特异性吸附防止剂的涂覆。例如，公开了将聚乙二醇部分子量350的聚乙二醇单甲基丙烯酸酯的乙烯基聚合物涂布于丙烯酸树脂基板上的方法(专利文献2)、使PEG₃-OH烷硫醇键合于蒸镀有铬和金的载玻片的方法(专利文献3)。