[发明专利]制备细胞外囊泡的流体系统及相关方法

权利要求书

1.一种用于由生产细胞(6)制备细胞外囊泡(EV)的流体系统(1)，其包括至少一个容器(4)、被容器(4)包含的液体培养基(5)和生产细胞(6)，其特征在于所述流体系统(1)还包括悬浮在液体培养基(5)中的微载体(3)和液体培养基(5)的搅拌器(7)，大多数生产细胞(6)黏附在微载体(3)的表面上，所述搅拌器(7)和所述容器(4)的形状和尺寸适于在容器(4)中生成液体培养基(5)的湍流。

2.根据权利要求1所述的流体系统(1)，其中所述液体培养基(5)的搅拌器(7)和所述容器(4)的尺寸适于控制所述液体培养基(4)的流，所述流的柯尔莫哥洛夫长度小于或等于75μm。

3.根据权利要求1或2所述的流体系统(1)，其包括输出口(9)和连接至所述输出口(9)的连接器(13)，所述连接器(13)能够包含液体培养基(5)和细胞外囊泡(EV)。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的流体系统(1)，其中液体培养基的搅拌器(7)是旋转搅拌器，其旋转速度、形状和尺寸与所述容器(4)的形状和尺寸相适应，以在容器中生成液体培养基(5)的湍流。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的流体系统(1)，其中所述微载体(3)是微珠(14)，所述微珠(14)的直径为100μm至300μm。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的流体系统(1)，其包含细胞外囊泡(EV)的分离器(15)，所述分离器(15)与所述容器(4)流体连接，从而能够将不含细胞外囊泡(EV)的液体培养基(5)重新引入容器(4)。

7.一种由生产细胞(6)离体制备细胞外囊泡(EV)的方法，其中：

·控制引起容器(4)中液体培养基(5)的湍流的搅拌器(7)，所述容器包括输出口(9)，所述液体培养基(5)包含黏附在微载体(3)的表面上的生产细胞(6)，所述微载体(3)悬浮在液体培养基(5)中，和

·在容器(4)的输出口(9)处收集包含细胞外囊泡(EV)的液体培养基(5)。

8.根据权利要求7所述的方法，其中将所述液体培养基(5)搅拌超过三十分钟。

9.根据权利要求7或8所述的方法，其中控制所述搅拌器(7)以使所述液体培养基(5)流动，流的柯尔莫哥洛夫长度小于或等于75μm，优选小于或等于75μm。

10.根据权利要求7至9中任一项所述的方法，其中分离器使在容器(4)的输出口处收集的一部分液体培养基(5)不含细胞外囊泡(EV)，并且其中将这部分液体培养基(5)重新引入到容器(4)中。

11.一种通过根据权利要求7至10中任一项所述的方法能够获得的细胞外囊泡(EV)。

12.一种包含根据权利要求11所述的细胞外囊泡(EV)的药物组合物。

13.根据权利要求12所述的药物组合物，用于再生医学中。