[发明专利]多路复用的受体-配体相互作用筛选在审
申请号: | 201880051978.7 | 申请日: | 2018-07-05 |
公开(公告)号: | CN111133100A | 公开(公告)日: | 2020-05-08 |
发明(设计)人: | 斯里拉姆·科苏里;埃里克·琼斯 | 申请(专利权)人: | 加利福尼亚大学董事会 |
主分类号: | C12N5/0793 | 分类号: | C12N5/0793;C12N15/63;C12N15/79;C40B40/06;C40B40/08 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 郑斌;刘振佳 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 多路复用 受体 相互作用 筛选 | ||
1.一种核酸,其包含:
i)异源受体基因;
ii)包含受体应答元件的诱导型报告物;其中所述报告物的表达依赖于由所述受体基因编码的受体的活性的激活,并且其中所述报告物包含条形码,所述条形码包含对于所述异源受体基因独特的索引区。
2.一种包含权利要求1的核酸的载体。
3.一种包含异源受体基因的载体。
4.权利要求3的载体,其中所述载体还包含诱导型报告物;其中所述报告物的表达依赖于由所述受体基因编码的受体的活性的激活,并且其中所述报告物包含条形码,所述条形码包含对于所述异源受体基因独特的索引区。
5.一种包含诱导型报告物的载体,其中所述报告物包含条形码。
6.权利要求2-4中任一项的载体,其中所述受体基因编码G蛋白偶联受体(GPCR)。
7.权利要求2-6中任一项的载体,其中所述受体基因还包含一种或多种另外的编码辅助多肽的多核苷酸。
8.权利要求7的载体,其中所述辅助多肽包含可选择或可筛选蛋白。
9.权利要求7或8的载体,其中所述辅助多肽包含蛋白质标签。
10.权利要求7-8中任一项的载体,其中所述辅助多肽包含转录因子。
11.权利要求10的载体,其中所述受体基因编码包含所述受体基因和所述辅助多肽的融合蛋白。
12.权利要求11的载体,其中所述融合蛋白在所述受体基因和所述辅助多肽之间包含蛋白酶位点。
13.权利要求2-12中任一项的载体,其中所述辅助多肽包含一个或多个运输标签。
14.权利要求13的载体,其中所述辅助多肽包含两个运输标签。
15.权利要求13或14的载体,其中所述运输标签包含Lucy和/或Rho标签。
16.权利要求2-15中任一项的载体,其中所述报告物由GPCR激活时的信号转导诱导。
17.权利要求2-16中任一项的载体,其中所述受体应答元件包含以下中的一种或多种:cAMP应答元件(CRE)、活化T细胞核因子应答元件(NFAT-RE)、血清应答元件(SRE)和血清响应因子应答元件(SRF-RE)。
18.权利要求17的载体,其中所述受体应答元件包含CRE。
19.权利要求18的载体,其中所述CRE包含SEQ ID NO:1的至少5个重复。
20.权利要求10-19中任一项的载体,其中所述受体应答元件包含由所述辅助多肽转录因子结合的DNA元件。
21.权利要求20的载体,其中所述辅助多肽转录因子包含反向四环素控制的转录激活物(rtTA),并且所述受体应答元件包含四环素应答元件(TRE)。
22.权利要求6-21中任一项的载体,其中所述GPCR是嗅觉受体(OR)。
23.权利要求2-22中任一项的载体,其中所述受体包含肾上腺素受体。
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