[发明专利]分离和检测癌症干细胞的方法

说明书

本发明涉及至少一种识别岩藻糖α1‑2半乳糖基元的凝集素用于在生物学样品中对牵涉呼吸的器官的癌症干细胞进行标记以获得经标记的牵涉呼吸的器官的癌症干细胞的体外用途。在一个特别的实施方案中，所述至少一种凝集素选自下列凝集素：荆豆(Ulex europaeus)凝集素1(UEA‑1)或其同源物日本栝楼(Trichosanthes japonica)凝集素II(TJA‑II)、双孢蘑菇(Agaricus bisporus)凝集素(ABA)、尾穗苋(Amaranthus caudatus)凝集素(ACA)、榴莲凝素、单叶格里丰木(Griffonia simplicifolia)凝集素I(GSL‑I)和单叶格里丰木凝集素II(GSL‑II)。在一个特别的实施方案中，所述牵涉呼吸的器官选自肺、喉、咽、口、鼻、喉咙、舌、窦、气管和唾液腺，所述唾液腺包括扁桃体和腮腺。

本发明涉及分离和检测牵涉呼吸的器官的癌症干细胞(Cancer Stem Cell；CSC)的方法。

在法国，肺癌在男性中是由癌症引起的死亡的第一原因和在女性中是第二原因，第一原因是乳腺癌。它每年触及37000人。5年存活率是非常低的，因此在该病理学状况中所介入的早期诊断的概念正是本发明具有其全部意义所在。

与其他类型的癌症一样，肺癌具有多种在所涉及的人群中导致高死亡率的因素，其中尤其是迟的诊断，由此同时带来所谓的转移性的更加晚期的癌症以及高的复发率。这是因为，该比率直接取决于检出该癌症时所处于的阶段。然而，应当知道即使检测阶段是早期，复发率仍然是高的，因为某些参数目前未被考虑到。

这是因为，该复发现象可以部分地用迄今未加考虑的肿瘤进展以及抗性机制(其基于癌症干细胞或肿瘤起始细胞或癌前细胞的存在)来进行解释。肿瘤对于放射治疗性处理和化学治疗性处理的治疗逃逸取决于在肿瘤内部这些细胞的存在。因此，在肿瘤组织中这些细胞的检测是用于确定肿瘤的侵袭性水平的一种手段。因此，对于癌症干细胞来说特异性的生物标志物的表征在肿瘤治疗中具有巨大的诊断和预后利益。但是，当前不存在允许确信地将癌症干细胞与其他肿瘤细胞相区别的对于癌症干细胞(CSC)来说特异性的标志物。

对于分离和表征CSC来说的主要困难在于其群体的有限的大小(肿瘤群体的3-4％)和特异性标志物的缺乏。

因此，存在重大的对于早期诊断癌症干细胞和开发新的用于检测和/或分离癌症干细胞的方法的需求。

癌症干细胞的存在的早期鉴定使得能够为临床医生提供该疾病的预测性因素。

此外，它还将会提供在癌症危险性的诊断中的新前景。这是因为，对于临床医生来说可得的补充信息应当允许通过治疗的适应调整来限制该疾病的复发或恶化的风险。

除了肺之外的牵涉呼吸的器官的癌症在法国是常见的癌症：其是在男性中第4的癌症类型，占癌症的10％。另外，观察到在法国的北部和南部地区之间的巨大的不均等，其中相对于全国平均值而言，在北部发病率高出20％多。还存在死亡率的巨大的社会不平等。

在2012年，除了肺癌之外的牵涉呼吸的器官的癌症的发病率据估计为11320个新病例，其中71％的病例影响男性。

按频率递减的顺序，其为：

·咽癌：47％

·口腔癌，包括舌癌：25％

·喉癌：25％

·唾液腺癌：6％

·面部的窦癌：1％。

这些是主要触及男性(1名女性:7名男性)和尤其是吸烟者的疾患。

本发明涉及特异性的检测方法，因为它仅识别牵涉呼吸的器官的癌症干细胞并因此比传统方法更有效。此外，它的实施相对于现有的方法而言更快速，因为现有的方法由于其不可再现性而是不可普及的并且同时集中了癌症干细胞和癌症非干细胞。