[发明专利]分离和检测癌症干细胞的方法

权利要求书

1.至少一种识别岩藻糖α1-2半乳糖基元的凝集素用于在生物学样品中对牵涉呼吸的器官的癌症干细胞进行标记以获得经标记的牵涉呼吸的器官的癌症干细胞的体外用途。

2.根据权利要求1的体外用途，其中所述岩藻糖α1-2半乳糖基元为岩藻糖α1-2半乳糖β1-4N-乙酰葡糖胺基元。

3.根据权利要求1或2中任一项的体外用途，其中所述至少一种凝集素选自下列凝集素：荆豆凝集素1(UEA-1)或其同源物日本栝楼凝集素II(TJA-II)、双孢蘑菇凝集素(ABA)、尾穗苋凝集素(ACA)、榴莲凝素、GSL-I和GSL-II即单叶格里丰木凝集素I(GSL-I)和单叶格里丰木凝集素II(GSL-II)，

尤其是至少两种选自UEA-1或其同源物TJA-II、ABA、ACA、榴莲凝素、GSL-I和GSL-II的凝集素，特别是GSL-I和GSL-II的混合物，或者UEA-1和GSL-I的混合物，

尤其是至少三种选自UEA-1或其同源物TJA-II、ABA、ACA、榴莲凝素、GSL-I和GSL-II的凝集素，特别是UEA-1、榴莲凝素和ABA的混合物，或者UEA-1、榴莲凝素和ACA的混合物。

4.根据权利要求1至3之一的体外用途，其中使用至少两种凝集素，所述至少两种凝集素处于等摩尔量。

5.根据权利要求1至3之一的体外用途，其中使用至少两种凝集素，所述至少两种凝集素处于非等摩尔量。

6.根据权利要求5的体外用途，其中使用两种凝集素，所述2种凝集素是以2:1、3:1或4:1的重量比的处于非等摩尔量的UEA-1和GSL-I。

7.权利要求1至6中任一项的体外用途，其中所述对牵涉呼吸的器官的癌症干细胞进行标记用与选自下列各项的标记物相缀合的凝集素来施行：

-荧光团，其特别地选自罗丹明、FITC或Alexa Fluor，

-放射性同位素，其特别地选自碘125、氚或锝，

-使用生色或发光底物的酶，所述酶特别地选自辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶或β-半乳糖苷酶，

-金珠粒，或

-生物素。

8.根据权利要求1至7中任一项的体外用途，其中所述对牵涉呼吸的器官的癌症干细胞进行标记用经缀合的凝集素来施行，并且随后为通过检测所述经缀合的凝集素来检测所述经标记的牵涉呼吸的器官的癌症干细胞。

9.根据权利要求1至8中任一项的体外用途，其中所述用与标记物相缀合的凝集素对牵涉呼吸的器官的癌症干细胞进行标记随后为分离所述经标记的牵涉呼吸的器官的癌症干细胞，

其中所述标记物为生物素，并且所述分离通过由磁性珠粒构成的用链霉抗生物素蛋白或抗生物素蛋白进行官能化的支持物并且在磁铁存在下来施行，或者

其中所述标记物为荧光团，并且所述分离以流式细胞术来施行。

10.根据权利要求1至9中任一项的体外用途，其中所述生物学样品为牵涉呼吸的器官的生物学样品。

11.根据权利要求1至10中任一项的体外用途，其中所述牵涉呼吸的器官选自肺、喉、咽、口、鼻、喉咙、舌、窦、气管和唾液腺，所述唾液腺包括扁桃体和腮腺。

12.在生物学样品中检测牵涉呼吸的器官的癌症干细胞的体外方法，所述方法包括下列步骤：

(a)用至少一种识别岩藻糖α1-2半乳糖基元的凝集素对牵涉呼吸的器官的癌症干细胞进行标记以获得其中牵涉呼吸的器官的癌症干细胞被至少一种凝集素标记的生物学样品的步骤，所述凝集素与选自荧光团、放射性同位素、酶、金珠粒或生物素的标记物相缀合，

随后为

(b)检测所述被至少一种凝集素标记的牵涉呼吸的器官的癌症干细胞的步骤。