[发明专利]人类中AAV基因疗法的手段和方法

说明书

本发明涉及用于人类中基于AAV的基因疗法的手段和方法。特别地，本发明涉及人类患者的治疗，所述人类患者可能被怀疑具有针对打算用于所述治疗的AAV的抗体。

发明领域

本发明涉及用于人类中基于AAV的基因疗法的手段和方法。特别地，本发明涉及人类患者的治疗，所述人类患者可能被怀疑具有针对打算用于所述治疗的AAV的抗体。

发明背景

腺相关病毒(AAV)被认为是用于人类基因疗法最有希望的病毒载体之一。AAV具有有效感染分裂人类细胞以及非分裂人类细胞的能力。野生型AAV病毒基因组整合到宿主细胞基因组中的单个染色体位点中，并且最重要的是，即使AAV存在于许多人类中，其也并未与任何疾病相关。鉴于这些优点，重组腺相关病毒(rAAV)正在B型血友病、恶性黑素瘤、囊性纤维化和其他疾病的基因疗法临床试验中进行评估。大量的临床试验和欧洲的基因疗法药物如Alipogene tiparvovec(，uniQure)的批准，有望使AAV成为临床实践的主体。

成功施用AAV载体的一个主要挑战是克服在暴露于基于野生型AAV或AAV的载体后发展的中和抗体(免疫球蛋白)(NAb)的存在。在这两种情况下，针对病毒衣壳蛋白的中和血清型特异性抗体可降低用相同血清型AAV的基因转移效率。

与其他血清型相比，观察到人类中针对AAV5血清型的特有的(endemic)NAB滴度相对较低(Boutin et al.，Hum Gene Ther 2010，21：704-712)。在用AAV治疗人类中，已经报道了如此低的特有的NAB滴度影响转导并导致转基因表达严重降低(Manno et al.，NatureMedicine，2006，12(3)，342-347)。因此，该领域的普遍共识是避免治疗具有完全NAB滴度的患者。因此，目前临床上关于预先存在的免疫力的实践涉及对人类患者进行筛选以排除应该具有针对AAV衣壳的中和抗体的患者(Brimble et al.Expert Opin Biol Ther 2016，16(1)：79-92和Boutin et al.Hum Gene Ther 2010，21：704-712)。为了减少第一次施用时NAb的形成以允许第二次施用，已经尝试了免疫抑制方案(Corti et al.，Mol Ther-MethClin Dev(2014)1，14033；Mingozzi et al.Mol Ther vol.20no.7，1410-1416；McIntoshet al.Gene Ther 2012，19，78-85))。此外，已经提出了克服预先存在的抗体的策略，其包括血浆置换和免疫抑制方案的使用(例如Chicoine et al.，Mol Ther 2014，vol.22no.2338-347；Hurlbut et al.Mol Ther 2010，vol.18no.11 1983-1984and Mingozzi etal.Mol Ther vol.20no.7，1410-1416)。这些策略已在动物模型中测试，其得到了有限的成功。

因此，本领域需要使得能够在具有或可能怀疑具有AAV中和抗体的人类患者中施用rAAV基因疗法载体。

发明简述

现在，本发明人已经出乎意料地发现，特别是对于AAV5基因疗法载体，并且与现有技术的建议相反，具有特有的预先存在的抗AAV5抗体(即由特有的暴露所致的预先存在的抗AAV5抗体)的人类患者可被视为适合于进行治疗。这与现有技术中应将中和抗体的存在视作排除标准(例如对于参加临床试验的患者)的看法相反。换句话说，现有技术的看法是，具有针对AAV5的抗体，更特别是针对AAV5的特有的预先存在的抗体的患者不被认为适合于进行用AAV5基因疗法载体的治疗。本文公开的令人惊讶的发现是，具有特有的预先存在的抗AAV5抗体的人类患者可以被认为适合于进行治疗，该发现不仅涉及例如发现具有非常低水平的预先存在的抗AAV5抗体的人类患者的亚群，更确切的说，该发现基本上涉及大多数(如果不是全部)人类群体中针对预先存在的抗AAV5抗体评分为阳性并且先前未进行过任何AAV5基因疗法的患者。