[发明专利]具有化学修饰的骨架的生物缀合物

说明书

本文提供了包含共价地结合至化学修饰的聚糖骨架的胶原结合肽的合成生物缀合物、包含其的组合物及其用途。

相关申请的交叉引用

本申请根据35 USC 119(e)要求2017年7月7日提交的美国临时专利申请号62/530,066的利益，其公开内容通过引用整体并入本文。

技术领域

本文提供了包含共价地结合至化学修饰的聚糖骨架的胶原结合肽的合成生物缀合物、包含其的组合物、及其用途。

背景技术

在组织中，细胞被包含各种大分子的细胞外基质（ECM）包围，所述大分子例如是生物缀合物、胶原、透明质酸、层粘连蛋白、纤连蛋白等。在哺乳动物中，生物缀合物是细胞外基质的主要成分，在此它们与其他生物缀合物、透明质酸、以及纤维基质蛋白质（例如胶原）形成大的复合物。随着哺乳动物年龄增长、伤口持续，以及在某些疾病状态中，身体的某些部位（例如滑膜关节、玻璃体液、脊椎盘、皮肤等）中的细胞外基质可能会丢失或降解，引起不良的症状。另外，诸如血管损伤、角膜损伤和伤口的一些组织损伤会导致细胞外基质和/或其组分（包括胶原）的暴露。

概述

令人惊讶地，本文所述的生物缀合物代谢不良，因为它们未发现是GAG降解酶的底物，并且发现与非硫酸化衍生物相比，它们靶向肝并同时具有延长的半衰期和降低的肾清除率。本公开提供了包含至少一个肽的生物缀合物，其中所述肽包含共价地键合至化学硫酸化（chemically sulfated）的聚糖的胶原结合单元。

本文还提供了包含本文所述的生物缀合物的组合物、及其使用方法。在一个方面，提供了包含如本文所述的生物缀合物的组合物，其中结合至聚糖的肽的数目变化。例如，该组合物可以包含生物缀合物，其中结合至其上的肽的数量被计算为平均值，例如每个聚糖约50至约150个肽。

本文还提供了药物组合物，其包含本文所述的生物缀合物或包含其的组合物以及一种或多种稀释剂或载体（例如盐水）。

本文所述的生物缀合物和包含其的组合物可以被用于治疗有需要的患者的纤维化，包括但不限于肺纤维化、囊性纤维化、特发性肺纤维化、肾纤维化、肝纤维化（例如慢性酒精暴露、乙型肝炎病毒（HBV）感染、非酒精性脂肪肝疾病（NAFLD）、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）、丙型肝炎病毒（HCV）感染、威尔逊氏（Wilson's）病、α-1-抗胰蛋白酶缺乏症、血色素沉着症、原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎、或自身免疫性肝炎导致的肝纤维化）、肝硬化、心脏纤维化、心房纤维化、心肌内膜纤维化、心肌梗塞、神经胶质瘢痕、关节纤维化、克罗恩（Crohn's）病、杜普伊特伦（Dupuytren's）挛缩、瘢痕疙瘩、纵隔纤维化、骨髓纤维化、佩罗尼氏（Peyronie's）病、肾源性全身纤维化、进行性大块纤维化、腹膜后纤维化、硬皮病、全身性硬化症和粘连性囊炎。

本文还提供了制备本文所述的生物缀合物的方法，其包括在偶联反应条件下，任选地在活化剂的存在下，使化学硫酸化的聚糖与至少一个肽接触以提供所述生物缀合物，其中所述肽包含胶原结合单元。在某些实施方案中，该方法首先包括：在足以提供化学硫酸化的聚糖的反应条件下，通过使聚糖与硫酸化剂接触来提供所述化学硫酸化的聚糖。

附图说明

可以通过附图查看本发明的一些方面。本文包括以下附图：

图1示出了化合物1的两个剂量的肝脏中的羟基脯氨酸含量。

图2示出了CCl₄模型中肝脏的天狼星红染色。

图3示出了与缬沙坦相比，通过天狼星红染色在组织学上测量的化合物1的两个剂量的肝脏中胶原蛋白含量。

图4示出了与替米沙坦相比，通过天狼星红在组织学上测量的化合物1的两个剂量的肝脏中的胶原蛋白含量。

图5示出了NASH模型中9周龄的动物中肝脏甘油三酯水平。