[发明专利]制备巨型单层囊泡形式的功能性合成细胞的方法有效
申请号: | 201880040090.3 | 申请日: | 2018-06-06 |
公开(公告)号: | CN110753539B | 公开(公告)日: | 2022-05-31 |
发明(设计)人: | 约阿希姆·P·斯巴茨;露西娅·T·本克;约翰内斯·帕特里克·弗龙迈耶;芭芭拉·哈勒尔;扬-维利·亚尼施;伊利亚·普拉兹曼;玛丽安·魏斯 | 申请(专利权)人: | 马克思-普朗克科学促进协会 |
主分类号: | A61K9/127 | 分类号: | A61K9/127 |
代理公司: | 华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 方宇 |
地址: | 德国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 制备 巨型 单层 形式 功能 合成 细胞 方法 | ||
1.一种制备巨型单层囊泡(36、66)形式的原始细胞的方法,所述方法包括以下步骤:
a)提供由外部聚合物壳(12)包封的水基液滴(10),所述外部聚合物壳(12)与所述液滴(10)的内部空间(14)邻接,其中所述液滴(10)的最大尺寸为0.5μm至1,000μm,其中所述液滴(10)的所述内部空间(14)含有至少一种脂质(20),在步骤a)中提供分散体,其中所述液滴(10)分散在油相中,其中包括所述至少一种脂质(20)的含水相包含在所述液滴的所述内部空间中,
b)将所述液滴(10)的脂质内容物(20)转化成脂质双层(34),所述脂质双层(34)布置在所述聚合物壳(12)的内表面和油相(15)上并覆盖所述聚合物壳(12)的所述内表面和所述油相(15),以形成聚合物壳稳定化巨型单层囊泡(36),
c)任选地将一种或多种蛋白质和/或核引入步骤b)中提供的所述聚合物壳稳定化巨型单层囊泡(36)中,以及
d)任选地从所述聚合物壳稳定化巨型单层囊泡(36)中去除所述聚合物壳(12)。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤a)中提供的所述液滴(10)为球形且外径为0.5μm至1000μm。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述液滴(10)的所述外径为10μm至1200μm。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述液滴的所述聚合物壳由共聚物制成,所述共聚物具有布置在所述聚合物壳的外侧的亲脂端或疏水端(16)和布置在所述聚合物壳的内侧的亲水端(18)。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述液滴(10)的所述聚合物壳(12)由二嵌段共聚物、三嵌段共聚物或统计共聚物制成。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,i)所述液滴(10)的所述聚合物壳(12)由包含疏水性全氟化聚合物嵌段(16)和亲水性聚醚二醇嵌段(18)的二嵌段共聚物制成,所述疏水性全氟化聚合物嵌段(16)布置在所述聚合物壳(12)的所述外侧,所述亲水性聚醚二醇嵌段(18)布置在所述聚合物壳(12)的所述内侧。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,ii)所述液滴(10)的所述聚合物壳(12)由三嵌段共聚物制成,所述三嵌段共聚物包括两个疏水性全氟化聚合物嵌段(16)以及在所述两个疏水性全氟化聚合物嵌段(16)之间的亲水性聚醚二醇嵌段(18),其中所述三嵌段共聚物被折叠,使得所述疏水性全氟化聚合物嵌段(16)布置在所述聚合物壳的所述外侧且所述亲水性聚醚二醇嵌段(18)布置在所述聚合物壳的所述内侧。
8.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,iii)所述液滴(10)的所述聚合物壳(12)由统计共聚物制成,所述统计共聚物由二嵌段共聚物和三嵌段共聚物的组合组成,所述二嵌段聚合物包括布置在所述聚合物壳(12)的所述外侧的疏水性全氟化聚合物嵌段(16)和布置在所述聚合物壳(12)的所述内侧的亲水性聚醚二醇嵌段(18),所述三嵌段共聚物包括两个疏水性全氟化聚合物嵌段(16)以及在所述两个疏水性全氟化聚合物嵌段(16)之间的亲水性聚醚二醇嵌段(18),其中所述三嵌段共聚物被折叠,使得所述亲脂性全氟化聚合物嵌段(16)布置在所述聚合物壳的所述外侧且所述亲水性聚醚二醇嵌段(18)布置在所述聚合物壳的所述内侧。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,包括在所述液滴(10)的所述内部空间中的所述脂质(20)是磷脂。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述脂质(20)选自磷酸胆碱、磷酸胆碱衍生物、磷酸乙醇胺、磷酸乙醇胺衍生物、磷脂酰胆碱、磷脂酰胆碱衍生物、磷脂酰甘油、磷脂酰甘油衍生物和两种或更多种上述脂质的任意组合。
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