[发明专利]多转入基因重组腺病毒

权利要求书

1.一种重组腺病毒，其包含编码第一治疗性转入基因的第一核苷酸序列、编码第二治疗性转入基因的第二核苷酸序列和配置在所述第一核苷酸序列与第二核苷酸序列之间编码可切割位点的第三核苷酸序列。

2.权利要求1的重组腺病毒，其中所述重组腺病毒包含以5’至3’方向包含所述第一核苷酸序列、第三核苷酸序列和第二核苷酸序列的多核苷酸序列。

3.权利要求1或2的重组腺病毒，其中所述重组腺病毒包含以5’至3’方向连续包含所述第一核苷酸序列、第三核苷酸序列和第二核苷酸序列的多核苷酸序列。

4.权利要求1-3中任一项的重组腺病毒，其中所述第一核苷酸序列、第三核苷酸序列和第二核苷酸序列被可操作地连接到任选地位于所述第一核苷酸序列的第一核苷酸的5’的单一启动子。

5.权利要求1-4中任一项的重组腺病毒，其中所述第一核苷酸序列、第三核苷酸序列和第二核苷酸序列被表达为单一多肽链。

6.权利要求1-5中任一项的重组腺病毒，其中所述重组腺病毒是5型腺病毒(Ad5)或2型腺病毒(Ad2)。

7.权利要求6的重组腺病毒，其中所述重组腺病毒是5型腺病毒(Ad5)。

8.权利要求1-7中任一项的重组腺病毒，其中所述可切割位点是可蛋白水解切割位点。

9.权利要求8的重组腺病毒，其中所述可蛋白水解切割位点被存在于真核细胞的内质网或高尔基体中的蛋白酶切割。

10.权利要求8或9的重组腺病毒，其中所述可蛋白水解切割位点是弗林蛋白酶可切割位点。

11.权利要求10的重组腺病毒，其中所述弗林蛋白酶可切割位点包含RX₁X₂R(SEQ IDNO：6)，其中X₁是任何氨基酸，并且X₂是Lys或Arg。

12.权利要求11的重组腺病毒，其中所述弗林蛋白酶可切割位点包含RAKR(SEQ ID NO：7)。

13.权利要求1-12中任一项的重组腺病毒，其中所述第一、第二和第三核苷酸序列被插入到位于E1b-19K的起始位点与E1b-19K的终止位点之间的E1b-19k插入位点中。

14.权利要求13的重组腺病毒，其中所述E1b-19K插入位点位于E1b-19K的起始位点与E1b-55K的起始位点之间。

15.权利要求13或14的重组腺病毒，其中所述E1b-19K插入位点包含在E1b-19K的起始位点附近约200个核苷酸的缺失。

16.权利要求15的重组腺病毒，其中所述E1b-19K插入位点包含在E1b-19K的起始位点附近202个核苷酸的缺失。

17.权利要求15的重组腺病毒，其中所述E1b-19K插入位点包含在E1b-19K的起始位点附近203个核苷酸的缺失。

18.权利要求13-17中任一项的重组腺病毒，其中所述E1b-19K插入位点包含对应于Ad5基因组(SEQ ID NO：1)的第1714-1916位核苷酸的缺失。

19.权利要求13-17中任一项的重组腺病毒，其中所述E1b-19K插入位点包含对应于Ad5基因组(SEQ ID NO：1)的第1714-1917位核苷酸的缺失。