[发明专利]通过适体调节的RNA酶P切割调控基因表达在审
| 申请号： | 201880029146.5 | 申请日： | 2018-03-02 |
| 公开（公告）号： | CN110582571A | 公开（公告）日： | 2019-12-17 |
| 发明（设计）人： | 郭雪翠 | 申请（专利权）人： | 梅里特斯英国第二有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/63;C12N15/86;C12N15/67;C12N15/861;C12P19/34;C12N15/11;C12N15/115 |
| 代理公司： | 72001 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人： | 甘霖;黄登高 |
| 地址： | 英国*** | 国省代码： | 英国;GB |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 适体 多核苷酸构建体 靶基因表达 核糖核酸酶 靶基因RNA 底物序列 调节基因 核糖开关 结合配体 构建体 效应物 底物 介导 配体 切割 响应 | ||
1.用于调控靶基因的表达的多核苷酸盒，其包含与核糖开关连接的RNA酶P底物序列，其中所述核糖开关包含效应物区和适体序列，其中所述效应物区包含与RNA酶P底物序列的部分互补的序列。
2.权利要求1的多核苷酸盒，其中所述适体结合小分子配体。
3.权利要求1的多核苷酸盒，其中所述RNA酶P底物序列包含编码tRNA、mascRNA、MENβtRNA-样结构、病毒tRNA-样结构、RNA酶P模型底物的序列和可以起始RNA酶P切割的同源序列。
4.权利要求1的多核苷酸盒，其中所述效应物区包含能够在配体结合适体后形成茎结构的序列，任选地，其中所述效应物区茎为6至12个碱基对。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的多核苷酸盒，其中所述适体序列位于RNA酶P底物序列的5′，且所述效应物区包含与RNA酶P底物的前导序列互补的序列。
6.权利要求5的多核苷酸盒，其中所述RNA酶P底物的受体茎和核糖开关效应物区被0、1、2、3或4个核苷酸隔开。
7.权利要求5的多核苷酸盒，其中所述效应物区另外包含与所述RNA酶P底物的受体茎序列互补的序列。
8.根据权利要求1至4中任一项所述的多核苷酸盒，其中所述适体序列位于RNA酶P底物序列的3′，且所述效应物区包含与RNA酶P底物序列的3′受体茎互补的序列。
9.权利要求8的多核苷酸盒，其中与RNA酶P底物的3′受体茎互补的效应物区序列为1至7个核苷酸。
10.调节靶基因的表达的方法，其包括：
a. 将权利要求1至4中任一项的多核苷酸盒插入靶基因的非翻译区(UTR)中，
b. 将包含所述多核苷酸盒的靶基因引入细胞中，和
c. 使细胞暴露于以有效增加靶基因的表达的量特异性结合适体的小分子配体。
11.权利要求10的方法，其中所述多核苷酸盒的适体序列位于RNA酶P底物序列的5′，且所述效应物区包含与RNA酶P底物的前导序列互补的序列。
12.权利要求11的方法，其中所述RNA酶P底物的受体茎和核糖开关效应物区被0、1、2、3或4个核苷酸隔开。
13.权利要求10的方法，其中所述多核苷酸盒的适体序列位于RNA酶P底物序列的3′，且所述效应物区包含与所述RNA酶P底物序列的3′受体茎互补的序列。
14.权利要求13的方法，其中与RNA酶P底物的3′受体茎互补的效应物区序列为1至7个核苷酸。
15.权利要求10的方法，其中将所述多核苷酸盒插入靶基因的5′非翻译区。
16.权利要求10的方法，其中将所述多核苷酸盒插入靶基因的3′非翻译区。
17.权利要求10的方法，其中将两个或更多个多核苷酸盒插入靶基因。
18.权利要求17的方法，其中两个或更多个多核苷酸盒包含特异性结合不同小分子配体的不同适体。
19.权利要求17的方法，其中两个或更多个多核苷酸盒包含相同的适体。
20.权利要求10的方法，其中所述靶基因进一步包含基因调节盒，其通过可变剪接的适体介导的调控来调节靶基因表达。
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