[发明专利]一种通过荧光金纳米簇探针检测胆固醇及其浓度的方法、检测胆固醇氧化酶及其浓度的方法

说明书

本发明提供了一种荧光金纳米簇在荧光法检测胆固醇和/或胆固醇氧化酶中的应用。本发明将荧光金纳米簇探针用于检测胆固醇和/或胆固醇氧化酶，具有灵敏度高，良好的选择性，线性范围较宽等特点。本发明建立的通过荧光纳米簇发射荧光方法来检测胆固醇，不仅避免了生物体其他因素的干扰，可以选择性的检测血液、尿液中胆固醇的浓度，可以无创地检测胆固醇浓度；而且使用荧光发射的方法检测胆固醇的浓度，而不是使用事先制备好的荧光金属纳米簇，最大限度地避免了实验中的假信号可能带来的干扰；同时检测过程中同时生成的荧光金纳米簇具有优良的荧光性质，在光学材料、生物医学等领域上的应用具有重要的意义。

技术领域

本发明涉及胆固醇检测技术领域，具体涉及一种荧光金纳米簇在荧光法检测胆固醇和/或胆固醇氧化酶中的应用、采用荧光金纳米簇荧光法检测胆固醇浓度的方法、采用荧光金纳米簇荧光法检测胆固醇氧化酶浓度的方法以及采用荧光金纳米簇荧光法检测样品中是否含有胆固醇或胆固醇氧化酶的方法，尤其涉及一种荧光金纳米簇在荧光法检测胆固醇和/或胆固醇氧化酶中的应用、通过荧光金纳米簇探针检测胆固醇及其浓度的方法、通过荧光金纳米簇探针检测胆固醇氧化酶及其浓度的方法以及通过荧光金纳米簇探针检测样品中是否含有胆固醇或胆固醇氧化酶的方法。

背景技术

近年来随着科技的发展，荧光纳米材料由于在量子尺寸效应、等离子共振效应及最子隧道效应等方丽的特性，展现出与众不同的光学、化学、也学以及催化性能，使其在科学界备受关注。目前已研究发现的荧光纳米材料主要有有机染料、碳量子点、聚合物点、半导体量子点、荧光金属纳米簇(FM NCs)等。这其中，金属纳米簇是一种特殊材料，在20世纪六十年代，已有研究者发现铜、银、金等金属有较弱的荧光，但其荧光产率特别低，随着技术的发展和社会的需要，荧光金属纳米簇的研究越来越受科研工作者的关注。FM NCs是由保护剂同一些(几个、数十个或者上百个)金属原子，如(Cu、Ag、Au、Pt)结合而成的粒径小于2nm的荧光纳米材料。金属纳米簇的尺寸介于金属原子和纳米粒子之间，当金属本体材料的尺寸降到纳米级别甚至接近于电子费米水平，原来连续的能带就会分裂成若干个分立能级，电子的运动将不再受空间的限制，而跃迁于各个能级之间；连续能级将被分裂成各种离散能级，从而使FM NCs具有独特的较强荧光性能。这些分立能级导致了纳米簇具有可调的激发，良好的水溶性，光稳定性和低毒性等特点。金属粒子的物理化学性能与其尺寸大小密切相关，并对其有依赖性。目前，研究发现的荧光金属纳米簇已有多种，例如铂纳米簇、金纳米簇、银纳米簇、铜纳米簇以及各种合金纳米簇等。

正是由于荧光金属纳米簇荧光强度较强，同生物分子具有良好的相容性且稳定性较好，而且合成方法较为简单，使其在环境监测、生物成像、疾病监测、催化、光电学等多个领域具有广阔的前景，特别是在生物小分子检测领域具有很高的应用价值。

胆固醇又称胆甾醇，一种环戊烷多氢菲的衍生物。胆固醇是动物组织细胞所不可缺少的重要物质，它不仅参与形成细胞膜，而且是合成胆汁酸，维生素D以及甾体激素的原料。同时胆固醇还是临床生化检查的一个重要指标，胆固醇浓度异常时将会引起许多疾病，会导致高胆固醇血症，对机体产生不利的影响，现代研究已发现，动脉粥样硬化、静脉血栓形成与胆石症与高胆固醇血症有密切的相关性。因此，建立简便、灵敏、准确的检测分析胆固醇的方法是十分必要的。

目前，现有文献中记载检测胆固醇的方法有气相色谱法、比色法、HDL-C检测方法、胆固醇同位素稀释液相色谱串联质谱分析法等，这类方法一般需要大型仪器而且操作比较复杂，设备昂贵、耗时长、灵敏度低等缺点，难以满足日常检测要求，大大限制了这些检测方法的推广和应用，也增加了使用方的成本。

因此，如何找到一种更加合适的检测胆固醇的方法，克服现有检测胆固醇的方法存在的上述缺陷，已成为诸多具有前瞻性的研究人员广为关注的焦点之一。

发明内容