[发明专利]一种同时测定地蜈蚣药材中5种黄酮类化合物的方法

说明书

本发明公开了一种同时测定地蜈蚣药材中5种黄酮类化合物含量的方法，包括：供试品溶液的制备、对照品溶液的制备和高效液相色谱检测分析等步骤。本发明首次同时检测地蜈蚣药材中5种黄酮类活性成分，即阿福豆素‑3‑O‑α‑L‑鼠李糖、紫云英苷、Multiflorin B、阿福豆苷和Multiflorin A。本发明的检测方法灵敏度高，重复性好，回收率高。本发明建立了以地蜈蚣中主要化学成分为检测指标的地蜈蚣药材的检测方法，对于地蜈蚣药材的质量控制研究和指导临床应用具有重要意义。

技术领域

本发明属于检测技术领域，具体涉及一种同时测定地蜈蚣药材中5种黄酮类化合物的方法。

背景技术

地蜈蚣来源于水龙骨科植物多羽节肢蕨Arthromeris mairei（Brause）Ching。别名搜山虎、过山龙等，是云南彝族习用药材，彝药名为“我背诺”，意译为“肚子胀的药”。其味苦，性微寒，归脾、胃经，具活络、消积滞、通便、降火之功，用于治疗食积胃痛、腹胀、便秘、风湿筋骨疼痛、坐骨神经痛、头痛、牙痛。该植物主要分布在云南、西藏、四川等地，缅甸和印度北部也有。

地蜈蚣药材为制剂“清肠通便胶囊”处方药材之一，目前被收载于《云南省药材标准》（一册）（2005版）。目前，已报道从地蜈蚣中分离出4个黄酮苷类化合物，如：蔷薇苷、山奈素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖（1→4）-α-L-吡喃鼠李糖苷、arthromerin A、arthromerin B。发明人在研究过程中，首次从地蜈蚣药材中分离得到5个黄酮类化合物：Multiflorin A、Multiflorin B、紫云英苷、阿福豆苷和阿福豆素-3-O-α-L-鼠李糖，其中Multiflorin A、Multiflorin B、阿福豆素-3-O-α-L-鼠李糖是其主要成分，紫云英苷和阿福豆苷是具有较强生理活性的黄酮苷类成分。这5个黄酮苷类成分是地蜈蚣药材的活性成分，建立以这5个黄酮苷类成分为检测指标的地蜈蚣药材检测方法，对于地蜈蚣药材和相关制剂的质量控制具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种同时测定地蜈蚣药材中5种黄酮类化合物的方法。

本发明通过以下方法实现本发明目的，包括供试品溶液制备、对照品溶液制备、检测和分析步骤，具体包括

（1）供试品溶液的制备：取地蜈蚣药材粉末约1g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇水50mL，称定质量，加热回流；放冷，再称定重量，加溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取滤液5mL置25mL的容量瓶中，加甲醇水定容，摇匀，即得供试品溶液；

（2）对照品溶液制备：

A、精密称定阿福豆素-3-O-α-L-鼠李糖对照品，用50%甲醇配制成浓度为20μg•mL^-1的对照品溶液，经0.45μm微孔滤膜过滤，即得对照品溶液A，备用；

B、分别精密称定紫云英苷、Multiflorin B、阿福豆苷、Multiflorin A对照品，混合后用甲醇配制成紫云英苷浓度0.8μg•mL^-1、Multiflorin B浓度54μg•mL^-1、阿福豆苷浓度1.5μg•mL^-1、Multiflorin A浓度20μg•mL^-1的混合溶液，得到对照品溶液即得对照品溶液B，备用；

（3）检测：将供试品溶液、对照品溶液A和对照品溶液B注入高效液相色谱仪进行检测；

（4）以外标法进行地蜈蚣药材中5种黄酮类化合物成分的定量分析：以已知浓度的黄酮类化合物的色谱峰面积比对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线，对供试品溶液进行测定，测得检出供试品溶液中5种黄酮类化合物成分的色谱峰面积，代入标准曲线，求得地蜈蚣药材中5种黄酮类化合物成分的含量。

步骤（1）中所述的地蜈蚣药材粉末的粒度为65目。