[发明专利]基于超高效液相色谱的单面针质量控制方法

权利要求书

1.一种基于超高效液相色谱的单面针质量控制方法，其特征在于，利用UPLC技术检测样品中氯化两面针碱含量，氯化两面针碱的质量比含量要求不低于0.001％；

所述超高效液相色谱的色谱条件如下：

色谱柱：ACQUITYUPLC BEH C18，柱长100mm，内径为2.1mm，粒径为1.7μm；ACQUITY UPLCShueldpr18；ACQUITY UPLC CSH C18；或ACQUITY UPLC CORTECS C18+；

流动相A为甲醇，流动相B为含有0.1％甲酸水；

梯度洗脱条件如下所示：

流速为0.3mL/min；柱温为30℃；检测波长为273nm。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，同时利用超高效液相色谱技术检测样品中木兰花碱含量，木兰花碱的质量比含量要求不低于0.1％。

3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，还同时利用超高效液相色谱技术检测样品中白藓碱含量，白藓碱的质量比含量要求不低于0.0003％。

4.根据权利要求1～3任一所述方法，其特征在于，超高效液相色谱检测方法中，供试样品的提取条件为：液料比50:1～6:1，超声提取25～55min。

5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，超高效液相色谱检测方法中，供试样品的提取条件为：液料比10:1，超声提取45min。

6.根据权利要求1～3任一所述方法，其特征在于，超高效液相色谱检测方法中，供试样品溶液的制备方法为：样品40～60℃真空干燥至恒重，粉碎，过40～60目筛，按照50:1～6:1液料比，用30～90％甲醇浸泡12～24h，200～300W、40～100kHz超声处理25～55min。

7.根据权利要求1～3任一所述方法，其特征在于，超高效液相色谱检测方法中，对照品溶液的制备：将氯化两面针碱、木兰花碱或白藓碱对照品分别加入甲醇中，分别制成0.2～2.0mg/ml的溶液。

8.根据权利要求1～3任一所述方法，其特征在于，超高效液相色谱检测方法中，上样量为1～5μl。

9.根据权利要求8所述方法，其特征在于，对照品溶液和供试品溶液各2μl分别注入高效液相色谱仪，测定，记录35分钟色谱图，供试品指纹图谱中，应分别呈现与对照品色谱保留时间相应的色谱峰；按中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算2～32分钟的色谱峰，供试品指纹图谱与对照品指纹图谱相似度不得低于0.90。

10.权利要求1～9任一项中所述单面针质量标准的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.样品收集：

S11.收集以下产地的单面针样品：陕西省汉中市南郊区、广东省广州市天河区、陕西省榆林市青云镇、湖南省吉首市双塘镇、陕西省安康市汉滨区、湖南省吉首市丹青镇、湖北省襄阳市保康县、湖南省湘西永顺县、湖北省襄阳市樊城区、湖南省张家界永定区、湖北省襄阳市南漳县、广东省广州市南沙区、四川省眉山市青神县、广西省南宁市江南区、四川省资阳市资中县、湖南省吉首市河溪镇、广西省来宾市象州县、湖南省湘西州永顺县、广西省玉林市玉州区、广西省桂林市资源县、广东省陆丰市碣石镇、湖南省湘西州花垣县、广东省广州市海珠区、湖南省湘西州芦溪县、广东省广州市番禺区；

S12.收集以下产地的两面针样品：广西玉林、湖南湘潭、湖南株洲、湖南岳阳、广西贺州、广西南宁、湖南常德、广东佛山、广东汕头、广东广州、广东清远、广东珠海、湖南长沙、湖北荆州、安徽亳州；

S2.制备供试品溶液和对照品溶液，方法分别如权利要求4和5中所述；

S3.以精密度试验、重复性试验、稳定性试验、标准曲线试验、加样回收试验确定UPLC色谱条件，如权利要求1中所述；

S4.将供试品溶液按照S3的色谱条件进行UPLC检测，建立指纹图谱；

S5.经过对指纹图谱分析、主成分分析和正交最小偏二乘-判别分析，筛选鉴定差异标记物，确定单面针有别于两面针的指标性成分；

S6.确定S5所述指标性成分的含量标准。