[发明专利]一种用胶乳免疫比浊法测定载脂蛋白C3的试剂盒

权利要求书

1.一种用胶乳免疫比浊法测定载脂蛋白 C3的试剂盒，其特征在于，该试剂盒含有试剂R1、试剂R2和校准品，其中试剂R1组成为：

缓冲液 10~200mmol/L

电解质 100 ~150mmol/L

表面活性剂 0.1 ~10 g/L

反应增强剂 50-60 g/L

稳定剂 0.1 ~10 g/L

防腐剂 0.1 ~10 g/L

试剂R2组成为：

缓冲液 10~200mmol/L

羊抗人载脂蛋白C3抗体胶乳颗粒 20~50ml/L

电解质 100 ~150mmol/L

表面活性剂 0.1 ~10 g/L

稳定剂 0.1 ~10 g/L

防腐剂 0.1 ~10 g/L

校准品组成为：

缓冲液 10~200mmol/L

重组载脂蛋白C3 10～15mg/dl

牛血清白蛋白 0.1～10g/L

山梨醇 0.1～10g/L

叠氮钠 0.1～10g/L 。

2.根据权利要求1所述的载脂蛋白 C3测定试剂盒，其特征在于，所述试剂 R2中的羊抗人载脂蛋白C3抗体胶乳颗粒为载脂蛋白C3抗体定向包被聚苯乙烯胶乳颗粒，制备方法采用以下步骤：

（1）聚苯乙烯氨基胶乳颗粒的激活：聚苯乙烯胶乳微球中加入乙基二甲基胺丙基碳化二亚胺室温反应1小时； 加入N-羟基琥珀酰亚胺，4℃反应过夜后离心，然后用缓冲液重复清洗沉淀，去上清，再用缓冲液重悬、震荡、超声处理后得到激活的聚苯乙烯胶乳颗粒；

（2）载脂蛋白C3抗体的氧化：用高碘酸钠将载脂蛋白C3抗体非结合活性区域Fc 端糖残基氧化成醛基 ；

（3）载脂蛋白C3抗体与聚苯乙烯胶乳颗粒的偶联：将载脂蛋白C3抗体加入到活化的聚苯乙烯微球溶液中，进行搅拌反应2小时，用葡萄糖溶液封闭后离心，并用缓冲液重复清洗沉淀后，再用缓冲液重悬、震荡、超声处理后，即得到偶联载脂蛋白C3抗体的聚苯乙烯胶乳微球。

3.根据权利要求1所述的载脂蛋白 C3测定试剂盒，其特征在于，所述试剂R2中的胶乳微球的平均粒径为50-200nm。

4.根据权利要求1所述的载脂蛋白 C3测定试剂盒，其特征在于，所述试剂R1的 pH 为5.0-10.0，试剂 R2 中的的pH为5.0-10.0，校准品的pH为6.5-10.0。

5.根据权利要求1所述的载脂蛋白 C3测定试剂盒，其特征在于，所述试剂R1 中反应增强剂为 PEG6000、PEG8000 和 PEG12000中的一种或多种。