[发明专利]一种组合物、利用该组合物制备双特异性脂质体纳米复合物的方法及该纳米复合物的应用

权利要求书

1.一种用于制备双特异性脂质体纳米复合物的组合物，其特征在于，所述组合物包含：

用于制备脂质体的组合物A：包含1-棕榈酰基-2-硬脂酰基卵磷脂、胆固醇、二硬质酰基脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000、双十二烷基二甲基溴化铵、二硬质酰基脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-马来酰亚胺，各组分的摩尔比为51.8:40:5:3:0.3；

人Endoglin适配体；和

CD3单克隆抗体；

其中，人Endoglin适配体和CD3单克隆抗体的用量符合如下条件：人Endoglin适配体和CD3单克隆抗体按照2:1的摩尔比混合均匀，混合液与采用组合物A制备的脂质体的摩尔比为1:10。

2.一种利用权利要求1所述的组合物制备双特异性脂质体纳米复合物的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)将溶解在氯仿中的1-棕榈酰基-2-硬脂酰基卵磷脂、胆固醇、二硬质酰基脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000、双十二烷基二甲基溴化铵、二硬质酰基脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-马来酰亚胺加入反应容器中；

(2)将反应容器置于旋转蒸发仪中，真空条件下水浴旋转；

(3)将反应容器放入真空干燥箱进行干燥；

(4)将收集到的反应产物与HEPES缓冲液混合，然后将混合溶液超声，得到白色悬浮液；

(5)将白色悬浮液装入脂质体挤推器，分别过200nm、100nm和50nm的聚碳酸酯膜，得到脂质体；

(6)采用二硫苏糖醇还原CD3单克隆抗体；

(7)将人Endoglin适配体与PBS缓冲液混合，配制成适配体溶液；

(8)将脂质体、步骤(6)处理后的CD3单克隆抗体、适配体溶液混合混匀，然后在氮气保护环境下反应；

(9)将反应后的溶液置于透析杯中以HEPES液透析，得到双特异性脂质体纳米复合物。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，将溶解在氯仿中的10.35nmol 1-棕榈酰基-2-硬脂酰基卵磷脂、8nmol胆固醇、1nmol二硬质酰基脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000、0.6nmol双十二烷基二甲基溴化铵、0.06nmol二硬质酰基脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-马来酰亚胺加入反应容器中。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，旋转蒸发的时间控制在10-15min。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述干燥的时间控制在3-4h。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，在步骤(4)中，所述超声的时间控制在5-10min。

7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，在步骤(5)中，过200nm的聚碳酸酯膜20次、100nm的聚碳酸酯膜20次和50nm的聚碳酸酯膜21次。

8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，在步骤(5)中，将得到的脂质体置于4℃的环境中进行保存。

9.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，在步骤(8)中，在氮气保护环境下反应24-30h。

10.一种利用权利要求2至9任一项所述方法制得的双特异性脂质体纳米复合物在制备治疗肿瘤药物中的应用。