[发明专利]SCA基因突变检测的引物、试剂盒及方法

权利要求书

1.一种引物对组合产品，其选自下列引物对中的至少一对：

SEQ ID NO：1和2、SEQ ID NO：3和4、SEQ ID NO：5和6、SEQ ID NO：7和8、SEQ ID NO：9和10、SEQ ID NO：11和12、SEQ ID NO：13和14、SEQ ID NO：15和16。

2.根据权利要求1所述的引物对组合产品，其中的部分或全部引物连接有barcode序列，以在扩增时用于区分不同样品。

3.一种试剂盒，其包含权利要求1或2所述的引物对组合产品。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括基因组DNA提取体系、PCR反应缓冲液、无核酸酶的水、DNA聚合酶、分子量marker中的一种或多种；

优选的，所述DNA聚合酶选自Taq、Bst、Vent、Phi29、Pfu、Tru、Tth、Tl1、Tac、Tne、Tma、Tih、Tf1、Pwo、Kod、Sac、Sso、Poc、Pab、Mth、Pho、ES4 DNA聚合酶、Klenow片段中的任一种。

5.根据权利要求3或4任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括末端修复酶、末端修复缓冲液、扩增或连接接头、接头链接缓冲液、DNA连接酶中的一种或多种。

6.组合物，其含有使用权利要求1或2所述的引物对组合产品、或权利要求3～5任一项所述的试剂盒扩增人DNA模板所得到的扩增子。

7.根据权利要求6所述的组合物，所述人DNA模板来自人的血液、血浆、细胞培养上清、唾液、精液、组织(例如羊水或绒毛)、组织裂解液、骨骼或毛发。

8.一种检测SCA基因重复序列动态突变和/或中断重复的非诊断目的方法，其特征在于，包括：

a)制备权利要求6或7所述的组合物；以及

b)用三代测序平台对扩增产物进行检测；

优选的，在进行三代测序时，对所述组合物中的扩增子的两端进行末端修复，再向经过末端修复的DNA两端连接扩增接头以构建三代测序的文库模型并上机测序。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，将三代测序的文库模型进行纯化后再上机测序。

10.权利要求1或2所述的引物对组合产品、或权利要求3～5所述的试剂盒在制备脊髓小脑性共济失调的诊断剂中的应用。