[发明专利]一种定量检测HBV核酸的方法及试剂盒在审
| 申请号: | 201811633138.X | 申请日: | 2018-12-29 |
| 公开(公告)号: | CN109694926A | 公开(公告)日: | 2019-04-30 |
| 发明(设计)人: | 蒋析文;夏乔;廖丽丽;李汉荣;杨鸿辉;韦思凤;唐康明 | 申请(专利权)人: | 中山大学达安基因股份有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司: | 上海助之鑫知识产权代理有限公司 31328 | 代理人: | 陈详 |
| 地址: | 510665 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 核酸 定量检测 试剂盒 实时荧光聚合酶链式反应 乙型肝炎 窗口期检测 检测试剂 检验检疫 临床诊断 鉴别 科学研究 跟踪 应用 | ||
1.一种用于检测乙型肝炎病毒(HBV)的PCR引物对组,其特征在于,所述引物对组包括第一引物对,所述第一引物对包括如SEQ ID NO.:1所示的正向引物;和,如SEQ ID NO.:2所示的反向引物。
2.如权利要求1所述的引物对组,其特征在于,所述引物对组还包括第二引物对,所述第二引物对包括如SEQ ID NO.:4所示的正向引物;和,如SEQ ID NO.:5所示的反向引物。
3.一种用于检测乙型肝炎病毒(HBV)的探针组,其特征在于,所述探针组包括:如SEQID NO.:3所示的针对乙型肝炎病毒S区基因保守序列的特异性的探针。
4.如权利要求3所述的探针组,其特征在于,所述探针组还包括:如SEQ ID NO.:6所示的针对乙型肝炎病毒C区基因保守序列的特异性的探针;优选地,所述探针组还包括:如SEQID NO.:7所示的内标探针。
5.一种用于检测乙型肝炎病毒(HBV)的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括HBV反应液B,所述HBV反应液B包括权利要求1所述的PCR引物对组。
6.如权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述HBV反应液B还包括权利要求3所述的探针组。
7.如权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括HBV反应液A,所述HBV反应液A包括选自下组的一种或多种组分:
热启动Taq酶、UDG酶和dNTPs。
8.如权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,
所述试剂盒还包括HBV定量参考品;
所述试剂盒还包括阴性质控品;
所述试剂盒还包括HBV强阳性质控品;
所述试剂盒还包括HBV临界阳性质控品;和/或
所述试剂盒还包括内标质控品。
9.一种检测乙型肝炎病毒(HBV)的方法,其特征在于,所述方法包括步骤:
(1)提供待检测样本,所述样本中含有HBV DNA;
(2)制备扩增反应体系,进行扩增反应,绘制扩增曲线,并计算阈值循环值从而获得样本核酸的定量检测结果:
其中,所述扩增反应体系包括步骤(1)提供的待检测样本、用于将待检测样本中HBVDNA进行扩增的PCR试剂、权利要求1所述的引物对组、和权利要求3所述的探针组。
10.权利要求1所述的引物对组、和权利要求3所述的探针组的用途,用于制备检测试剂盒,所述检测试剂盒用于乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量。
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