[发明专利]一种高纯度环肽化合物的制备方法

说明书

本发明公开了一种高纯度的环肽类化合物或其药学上可接受的盐的制备方法，该环肽类化合物化学结构如式I所示，用该方法制备式I化合物或其盐纯度至少达99％以上。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种高纯度环肽类化合物或其药学上可接受的盐的制备方法。

背景技术

近年来，随着光谱抗菌药物和免疫抑制剂的大量应用、肿瘤化疗、器官移植以及艾滋病的蔓延等，导致免疫系统受到抑制的人群不断增多，深部真菌感染的发病率开始呈现明显的上升趋势，且随着抗真菌药物的运用，真菌的耐药性也越来越强，使得抗真菌药物的应用有迅猛增加的趋势。因此，抗深部真菌感染的药物已成为抗感染药的研究热点之一，日益引起人们的关注。

棘白菌素是一类新型的抗真菌药物，与目前临床常用抗真菌药物的作用机制明显不同，是β-1，3-葡聚糖合成酶的抑制剂，作用于真菌的细胞壁。细胞壁是真菌与哺乳动物细胞之间最大的差别，所以干扰细胞壁的合成，影响细胞壁的完整性将导致真菌细胞死亡而对人无伤害，因此副作用小，安全性较高。

目前棘白菌素类药物已经有3个产品上市，即卡泊芬净、米卡芬净和阿尼芬净。其中米卡芬净由日本藤泽公司研制开发，2005年通过美国FDA认证，是继卡泊芬净之后FDA批准的第2中棘白菌素类抗真菌药物。对念珠菌属、曲霉菌属引起的深部真菌感染有广泛抗菌作用；同时，米卡芬净无肾毒性，并且与其他药物几乎无相互作用，因此有很好的临床应用的前景。

米卡芬净是一种水溶性半合成棘白菌素类抗真菌药物，由前体化合物I经脱酰基化酶水解后合成得到。米卡芬净前体化合物I是真菌鞘茎点霉属(Colephoma empetri)的发酵代谢产物，是合成米卡芬净的主要原料。

目前前体化合物I的制备均由鞘茎点霉属(Colephoma empetri)的发酵液，通过提取、树脂或硅胶纯化、结晶、浓缩干燥得到(如CN102952179)，工艺路线长，产品纯度不高，用该产品作为化合物I生产过程中的定量标准品，容易出现定量不准确的情况；本发明从化合物II出发，采用合成的方法制备高纯度的化合物I，该产品主要用于前体化合物I生产过程的定量标定。另外从发酵液中分离纯化出化合物I的结构类似物非常困难，在液相上结构类似物与化合物I也不能完全分开。相对来说从化合物II中分离纯化出化合物II结构类似物比较容易，因此可以先获得高纯度化合物II，然后用本发明中的方法制备高纯度I结构类似物。

发明内容

为了获得高纯度的化合物I，发明人经研究发现，相对来说从化合物II中分离纯化出化合物II结构类似物比较容易，因此考虑可以先获得高纯度化合物II，然后进一步制备高纯度化合物I；具体方法为：将活化好的棕榈酸侧链与化合物II化合物反应，结晶后得到化合物I粗品，再经过离子交换树脂和大孔吸附树脂的纯化得到高纯度化合物I。

本发明的一个方面提供了一种高纯度环肽类化合物或其药学上可接受的盐的制备方法，包括以下步骤：

(1)将棕榈酸、HOBT、DMF和四氢呋喃反应液降低至10℃后加入EDCI，升温并搅拌4h。

(2)将步骤(1)得到的反应液静置12h，加入有机溶剂i搅拌，抽滤，真空干燥，得棕榈酸侧链。

(3)将化合物II溶解在有机溶剂ii中，控制反应温度。

(4)加入棕榈酸侧链和DIPEA，在一定温度下反应。

(5)缓慢加入有机溶剂iii，搅拌，过滤后真空干燥，得到胺盐中间体。

(6)将胺盐中间体溶解在水中，使用离子交换树脂进行纯化，控制收集液温度和pH。

(7)将收集液经大孔吸附树脂纯化，用极性溶剂和水的混合液洗脱，收集合并洗脱液。

(8)将洗脱液浓缩，真空干燥，得到高纯度化合物I。