[发明专利]一种正确折叠的重组狂犬病毒G蛋白胞外段及其潜在应用

权利要求书

1.一种制备可溶、均一性好且具有正确的空间折叠的重组狂犬病毒G蛋白胞外段的方法，其特征在于，用柔性连接肽替换狂犬病毒G蛋白胞外段的第73～79位氨基酸所在区域，和狂犬病毒G蛋白胞外段的第117～125位氨基酸所在区域。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述狂犬病毒G蛋白胞外段为完整的胞外段或C-端截短的胞外段。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述完整的胞外段包括狂犬病毒G蛋白氨基酸序列第1～439位氨基酸；所述C-端截短的胞外段包括狂犬病毒G蛋白氨基酸序列第1～405位氨基酸，或第1～414位氨基酸，或第1～419位氨基酸，或第1～425位氨基酸，或第1～431位氨基酸。

4.根据权利要求1～3任一所述的方法，其特征在于，柔性连接肽为GS连接肽；所述GS连接肽为以下任一种：GGS、GGGS、(GS)₂、GGSGG、GGGGS、GSGSG、(GGS)₂、(GS)₃、GGSGGSG、GSGSGSG、GGGSGGG、(GS)₄、GGSGGSGG、(GGGS)₂、GSGSGSGSG、(GGS)₃、GGSGGSGGSG、(GS)₅、(GGGGS)₂、(GGSGG)₂、(G)₃、(G)₄、(G)₅、(G)₆、(G)₇、(G)₈、(G)₉、(G)₁₀。

5.根据权利要求1～3任一所述的方法，其特征在于，狂犬病毒的株系为以下任一种：CVS-11、2472、HEP-Flury、PV、Pitman Moore、MOR1-DG、MOR3-HM、NeiMeng1025C、FRA1-FX、CNX8601、CHI1-BK、MAU1-CL、Yunnan_Zt07、RVD。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，狂犬病毒的株系为以下任一种：CVS-11、2472、HEP-Flury、PV、Pitman Moore、MOR1-DG、MOR3-HM、NeiMeng1025C、FRA1-FX、CNX8601、CHI1-BK、MAU1-CL、Yunnan_Zt07、RVD。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，将所述G蛋白胞外段在昆虫细胞中表达。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述昆虫细胞选自Sf9或Hi5细胞。

9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于，还对分泌表达到细胞培养基上清中的蛋白进行亲和层析粗纯化。

10.应用权利要求1～9任一所述方法制备获得的重组狂犬病毒G蛋白胞外段。

11.含有权利要求10所述的重组狂犬病毒G蛋白胞外段的组合物。

12.根据权利要求11所述的组合物，其特征在于，所述组合物为疫苗候选组分、诊断试剂盒抗原组分或疫苗抗原含量标定的标准品。

13.权利要求10所述的重组狂犬病毒G蛋白胞外段或权利要求11所述的重组狂犬病毒G蛋白胞外段的组合物在生物、医药领域制备产品方面的应用。