[发明专利]一种特异性检测水稻稻曲病菌的方法及其应用在审
| 申请号: | 201811629327.X | 申请日: | 2018-12-28 |
| 公开(公告)号: | CN111378775A | 公开(公告)日: | 2020-07-07 |
| 发明(设计)人: | 俞咪娜;刘永锋;于俊杰 | 申请(专利权)人: | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 210014 江苏省南京*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 特异性 检测 水稻 病菌 方法 及其 应用 | ||
1.一种特异性检测水稻稻曲病菌的方法及其应用,其步骤如下:(1)制备待测DNA模板;(2)预备含有所述待测DNA模板的PCR反应体系;(3)进行PCR反应及结果观察;其特征在于,所述PCR反应体系中的引物是根据Seq ID No.1所示序列设计的正、反向引物,所述PCR扩增的阳性产物为Seq ID No.1所示的序列上正向引物完全互补识别的起始碱基至反向引物完全识别的末端碱基之间的核苷酸片段。
2.根据权利要求1所述的PCR方法,所述引物为:
正向引物SSR1-F:5’-CTCGAAACACGGCGCAACCAG-3’;
反向引物SSR1-R:5’-TTATGCAGTGCTGATCTGGC-3’,扩增阳性产物为437bp。
3.根据权利要求1或2所述的PCR方法,其特征在于:
1)所述PCR反应体系为:2×Taq Plus Master Mix 10μL、正反向引物各0.5μL(10nM),DNA模板1μL(约50ng)和灭菌超纯水8μL,总体积为20μL;
2)所述PCR反应程序为:94℃预变性3min,94℃变性30s、64℃退火30s、72℃延伸30s,35个循环,最后72℃延伸5min,4℃保温。
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