[发明专利]一种人脐带间充质干细胞无血清培养基在审
申请号: | 201811621520.9 | 申请日: | 2018-12-28 |
公开(公告)号: | CN109402051A | 公开(公告)日: | 2019-03-01 |
发明(设计)人: | 王玉娟;徐矫健;葛淑娟;刘燕丽 | 申请(专利权)人: | 青岛麦迪赛斯生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 266000 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 人脐带间充质干细胞 无血清培养基 增殖 碱性成纤维细胞生长因子 转化生长因子β 干细胞特性 基础培养基 人血白蛋白 无血清培养 致病微生物 成骨诱导 蛋白多糖 分化潜能 谷氨酰胺 异种蛋白 转铁蛋白 培养基 维生素C 胰岛素 黄体酮 螺旋藻 浓度计 皮质醇 速率和 血清 腐胺 贴壁 污染 | ||
1.一种人脐带间充质干细胞无血清培养基,其特征在于,所述的无血清培养基是包括如下浓度组分的α-MEM基础培养基:谷氨酰胺1-20mM、HEPEs 1-20mM、腐胺10-100μM、转铁蛋白0.1-10μM、维生素C 10-400μM、胰岛素1-10μM、黄体酮1-20nM、皮质醇10-200nM、人血白蛋白1-20mg/mL、碱性成纤维细胞生长因子1-10ng/mL、转化生长因子1-10ng/mL、速溶蛋白多糖1-50mg/mL。
2.如权利要求1所述的无血清培养基,其特征在于,所述的速溶蛋白多糖的制备方法如下:将螺旋藻干粉清洗,加水后在75-90℃下加热,然后冷却至常温,减压过滤分离,用盐酸调节滤液pH值至3-5,放置12-36h,4000rpm,离心15min离心;分离得到的上清液用Na2CO3溶液调节pH至7.0,然后喷雾干燥,得到藻蛋白多糖提取物。
3.如权利要求1所述的无血清培养基,其特征在于,所述的培养基中各组分的浓度如下:谷氨酰胺5mM,HEPEs 7mM,腐胺60μM、转铁蛋白1μM、维生素C 200μM、胰岛素6μM、黄体酮20nM、皮质醇110nM、人血白蛋白6mg/mL、碱性成纤维细胞生长因子2ng/mL、转化生长因子4ng/mL、速溶蛋白多糖5mg/mL。
4.如权利要求1或3所述的无血清培养基,其特征在于,所述的胰岛素为重组胰岛素。
5.如权利要求1或3所述的无血清培养基,其特征在于,所述的转化生长因子为转化生长因子-β1。
6.权利要求1或3所述的无血清培养基的制备方法,其特征在于,是向α-MEM基础培养基中,按所述浓度加入谷氨酰胺、HEPEs、腐胺、转铁蛋白、维生素C、胰岛素、黄体酮、皮质醇、人血白蛋白、碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子、速溶蛋白多糖,混匀,经0.2μm滤膜过滤除菌,得到人脐带间充质干细胞的无血清培养基。
7.权利要求1或3所述的无血清培养基在培养人脐带间充质干细胞中的应用。
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