[发明专利]VQRn-Cas9&PmCDA1&UGI碱基编辑系统在植物基因编辑中的应用

权利要求书

1.成套试剂，由M1、M2、M3和M4组成：

M1、VQRn-Cas9或与所述VQRn-Cas9相关的生物材料；

M2、PmCDA1或与所述PmCDA1相关的生物材料；

M3、UGI或与所述UGI相关的生物材料；

M4、如式I所示的sgRNA或与式I所示sgRNA相关的生物材料；

靶点序列转录的RNA-sgRNA骨架

(式I)

所述sgRNA骨架为将序列1的第571-646位或序列7中的T替换为U得到的RNA；

与式I所示sgRNA相关的生物材料，为下述G1)至G5)中的任一种：

G1)转录式I所示的sgRNA的核酸分子；

G2)含有G1)所述核酸分子的表达盒；

G3)含有G1)所述核酸分子的重组载体、或含有G2)所述表达盒的重组载体；

G4)含有G1)所述核酸分子的重组微生物、或含有G2)所述表达盒的重组微生物、或含有G3)所述重组载体的重组微生物；

G5)含有G1)所述核酸分子的转基因细胞系、或含有G2)所述表达盒的转基因细胞系。

2.根据权利要求1所述的成套试剂，其特征在于：

所述VQRn-Cas9为如下A1)、A2)或A3)：

A1)氨基酸序列是序列3的蛋白质；

A2)将序列表中序列3所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；

A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质；

与所述VQRn-Cas9相关的生物材料，为下述B1)至B5)中的任一种：

B1)编码所述VQRn-Cas9的核酸分子；

B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；

B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B2)所述表达盒的重组载体；

B4)含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物；

B5)含有B1)所述核酸分子的转基因细胞系、或含有B2)所述表达盒的转基因细胞系；

所述PmCDA1为如下C1)、C2)或C3)：

C1)氨基酸序列是序列4的蛋白质；

C2)将序列表中序列4所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；

C3)在C1)或C2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质；

与所述PmCDA1相关的生物材料，为下述D1)至D5)中的任一种：

D1)编码所述PmCDA1的核酸分子；

D2)含有D1)所述核酸分子的表达盒；

D3)含有D1)所述核酸分子的重组载体、或含有D2)所述表达盒的重组载体；

D4)含有D1)所述核酸分子的重组微生物、或含有D2)所述表达盒的重组微生物、或含有D3)所述重组载体的重组微生物；

D5)含有D1)所述核酸分子的转基因细胞系、或含有D2)所述表达盒的转基因细胞系；

所述UGI为如下E1)、E2)或E3)：

E1)氨基酸序列是序列5的蛋白质；

E2)将序列表中序列5所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；

E3)在E1)或E2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质；

与所述UGI相关的生物材料，为下述F1)至F5)中的任一种：

F1)编码所述UGI的核酸分子；

F2)含有F1)所述核酸分子的表达盒；

F3)含有F1)所述核酸分子的重组载体、或含有F2)所述表达盒的重组载体；

F4)含有F1)所述核酸分子的重组微生物、或含有F2)所述表达盒的重组微生物、或含有F3)所述重组载体的重组微生物；

F5)含有F1)所述核酸分子的转基因细胞系、或含有F2)所述表达盒的转基因细胞系。