[发明专利]一种奥曲肽的制备方法

权利要求书

1.一种奥曲肽的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)将Fmoc-Thr-Ol及催化剂加入到醛基树脂中进行缩合反应，得到Fmoc-Thr树脂复合物；

(2)按照固相多肽合成的方法，根据奥曲肽的序列，将保护氨基酸按C端至N端的顺序逐个偶联到步骤(1)所得树脂上获得保护的奥曲肽-树脂复合物；

(3)向保护的奥曲肽-树脂复合物中加入切割试剂，将奥曲肽从树脂上裂解下来，得到还原型奥曲肽粗品，将还原型奥曲肽粗品配制成一定的浓度，调节pH，加入氧化剂，反应后得到奥曲肽粗品。

(4)将奥曲肽粗品分离纯化，得到奥曲肽。

2.根据权利要求1所述的奥曲肽的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的催化剂为对甲苯磺酸。

3.根据权利要求2所述的奥曲肽的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的醛基树脂为4-苄氧基苯甲醛树脂。

4.根据权利要求3所述的奥曲肽的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的各物质间的比例为n(Fmoc-Thr-Ol)：n(对甲苯磺酸)：n(4-苄氧基苯甲醛树脂)＝1～3：0.1～0.5：1。

5.根据权利要求1所述的奥曲肽的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述的Fmoc脱保护试剂是体积比为1：1～4的哌啶与二甲基甲酰胺，所述Fmoc脱保护反应的温度为20～60℃。

6.根据权利要求1所述的奥曲肽的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述的缩合试剂为缩合试剂1，缩合试剂2以及缩合试剂3的一种或多种混合；其中，缩合试剂1为N,N-二环己基碳二亚胺、N,N-二异丙基碳二亚胺、苯并三氮唑-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯、卡特缩合剂、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷中的一种，缩合试剂2为1-羟基苯并三氮唑、N-羟基-7-偶氮苯并三氮唑中的一种，缩合试剂3为N,N-二异丙基乙胺。

7.根据权利要求6所述的奥曲肽的制备方法，其特征在于，所述各试剂的投料摩尔比为：氨基酸：缩合试剂1：缩合试剂2：缩合试剂3：树脂＝3～6：3～6：3～6：6～12：1。

8.根据权利要求6或7所述的奥曲肽的制备方法，其特征在于N,N-二环己基碳二亚胺或N,N-二异丙基碳二亚胺不与N,N二异丙基乙胺组合使用。

9.根据权利要求1所述的奥曲肽的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述的切割试剂为三氟乙酸混合液，所述的混合液中三氟乙酸的体积比不小于80％。

10.根据权利要求9所述的奥曲肽的制备方法，其特征在于：所述三氟乙酸混合液除了三氟乙酸还包括重蒸水、三乙基硅烷、1,2二硫苏糖醇、苯酚、苯甲硫醚、碘化铵、三异丙基硅烷、苯甲醚和乙二硫醇中的一种或多种混合。

11.根据权利要求1所述的奥曲肽的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述的还原型奥曲肽粗品浓度为0.1～1mg/ml，所述的pH范围为7～9。

12.根据权利要求1所述的奥曲肽的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述的氧化剂为空气或双氧水，优选地，氧化剂为双氧水。

13.根据权利要求12所述的奥曲肽的制备方法，其特征在于其中双氧水与还原型奥曲肽粗品的比例为n(还原型奥曲肽粗品)：n(双氧水)＝1：5～10。

14.根据权利要求1所述的奥曲肽的制备方法，其特征在于：步骤(4)中所述的奥曲肽粗品经反相高效液相色谱分离纯化，得到奥曲肽精品。

15.根据权利要求14所述的奥曲肽的制备方法，其特征在于：步骤(4)中所述的纯化条件为：制备柱填料为碳载硅胶，流动相为质量比为0.1％三氟乙酸的水、乙腈或甲醇溶液中的一种或多种混合。