[发明专利]一种血管内皮生长因子的检测试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种血管内皮生长因子的检测试剂盒，包括：链霉亲和素偶联的磁性微粒、生物素标记的VEGF抗体、化学发光标记物标记的VEGF抗体、VEGF标准品、化学发光预激发液、化学发光激发液、清洗液。

2.根据权利要求1所述的一种血管内皮生长因子的检测试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物为吖啶酯或吖啶酯衍生物，所述吖啶酯衍生物包括吖啶酯酸-NHS酯、吖啶酸丙磺酸钠盐或9-吖啶羧酸。

3.根据权利要求1所述的一种血管内皮生长因子的检测试剂盒，其特征在于，所述化学发光预激发液为含有质量百分比为0.1-1％的乙醇以及质量百分比0.1-1％的Triton X-100和/或Tween-20的质量分数为0.1-1％的H₂O₂溶液，所述化学发光激发液为含有质量百分比0.1-1％的乙醇以及质量百分比0.1-1％的Triton X-100和/或Tween-20的摩尔浓度为0.05-lmol/L的NaOH溶液。

4.根据权利要求1所述的一种血管内皮生长因子的检测试剂盒，其特征在于，所述链霉亲和素偶联的磁性微粒由pH为6-8、摩尔浓度为0.01-0.2mol/L的磷酸盐缓冲液或Tris缓冲液配制而成，粒径为0.05-2μm。

5.根据权利要求1所述的一种血管内皮生长因子的检测试剂盒，其特征在于，所述磁性微粒内核为四氧化三铁或三氧化二铁，磁性微粒的表面修饰基团为羧基。

6.根据权利要求1所述的一种血管内皮生长因子的检测试剂盒，其特征在于，所述VEGF标准品是以牛血清白蛋白缓冲液为溶剂，加入VEGF抗原纯品配制而成。

7.根据权利要求6所述的一种血管内皮生长因子的检测试剂盒，其特征在于，所述的VEGF标准品是配成的具有多个浓度梯度的VEGF标准品。

8.根据权利要求1所述的一种血管内皮生长因子的检测试剂盒，其特征在于，所述清洗液包括质量百分比0.5-10％的Triton X-100和/或Tween 20，pH为6-8、摩尔浓度为0.1-0.5mol/L的磷酸盐缓冲液或Tris缓冲液以及质量百分比0.5-5％的Proclin 300。

9.采用权利要求1-8任一项所述的一种血管内皮生长因子的检测试剂盒的检测方法，包括：

(1)取生物素标记的VEGF抗体、待测样品、化学发光标记物标记的VEGF抗体于反应容器中，充分混匀，并于37℃孵育10～30min，同时准备VEGF标准品；

(2)向反应体系中加入链霉亲和素偶联的磁性微粒，充分混匀，并于37℃孵育3～10min，后清洗分离磁性微粒；向磁性微粒中加入化学发光预激发液和化学发光激发液的混合溶液，反应并测定光强度；

(3)根据VEGF标准品浓度与光强度绘制标准曲线，样品光强度在标准曲线上相对应的浓度值即为待测样品的测定浓度。