[发明专利]呼吸道病原体的多重PCR检测试剂盒、用途及其使用方法

权利要求书

1.呼吸道病原体的多重PCR检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括检测甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感1、副流感II、副流感III、腺病毒、偏肺病毒和鼻病毒九种病原体的引物对及探针的混合物；

所述甲型流感病毒的引物对由SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的两条序列组成；

所述乙型流感病毒的引物对由SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示的两条序列组成；

所述呼吸道合胞病毒的引物对由SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的两条序列组成；

所述副流感病毒I的引物对由SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示的两条序列组成；

所述副流感病毒II的引物对由SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10所示的两条序列组成；

所述副流感病毒III的引物对由SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示的两条序列组成；

所述腺病毒的引物对由SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14所示的两条序列组成；

所述偏肺病毒的引物对由SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16所示的两条序列组成；

所述鼻病毒的引物对由SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18所示的两条序列组成；

所述甲型流感病毒的探针为SEQ ID NO:19所示的序列或其反向互补序列；

所述乙型流感病毒的探针为SEQ ID NO:20所示的序列或其反向互补序列；

所述呼吸道合胞病毒的探针为SEQ ID NO:21所示的序列或其反向互补序列；

所述副流感病毒I的探针为SEQ ID NO:22所示的序列或其反向互补序列；

所述副流感病毒II的探针为SEQ ID NO:23所示的序列或其反向互补序列；

所述副流感病毒III的探针为SEQ ID NO:24所示的序列或其反向互补序列；

所述腺病毒的探针为SEQ ID NO:25所示的序列或其反向互补序列；

所述偏肺病毒的探针为SEQ ID NO:26所示的序列或其反向互补序列；

所述鼻病毒的探针为SEQ ID NO:27所示的序列或其反向互补序列。

2.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述的探针的两端分别带有荧光基团和猝灭基团，所述荧光基团为VIC，ROX，FAM和CY5中的一种，所述猝灭基团为BHQ1、BHQ2、BHQ3和MGBNFQ中的一种。

3.如权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于：所述检测试剂盒还包括PCR反应液，所述反应液主要由如下组分组成：10×Bufferfor Taq 10％-50％；MgCl₂ 1-10mM；DTT 0-5mM；dATP 0.05-1mM；dCTP 0.05-1mM；dGTP 0.05-1mM；dUTP 0.1-2mM。

4.如权利要求3所述的检测试剂盒，其特征在于：所述反应液还包括BSA 0-10mg/mL和甘油0％-10％。

5.如权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于：所述PCR反应液主要由如下组分组成：10×Buffer for Taq 15％；MgCl₂ 2mM；DTT 1mM；dATP 0.2mM；dCTP 0.2mM；dGTP0.2mM；dUTP 0.4mM；BSA 1.5mg/mL和甘油5％。

6.如权利要求3所述的检测试剂盒，其特征在于：所述检测试剂盒还包括PCR酶液，所述PCR酶液主要由如下组分组成：Taq DNA Polymerase 10-50％；UNG 0-20％；SuperscriptV0.1％-10％；DTT 0-5mM；甘油0-50％。

7.如权利要求6所述的检测试剂盒，其特征在于：所述PCR酶液还包括Anti-Taq0-50％。