[发明专利]治理苏氨酸母液和分离提取蛋白的方法

权利要求书

1.治理苏氨酸母液和分离提取菌体蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：步骤1）制备产朊假丝酵母菌和干酪乳杆菌的发酵菌液，步骤2）制备水华鱼腥藻液，步骤3）母液处理，步骤4）分离提取蛋白。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，

步骤1）制备产朊假丝酵母菌和干酪乳杆菌的发酵菌液：取适量苏氨酸母液，100℃煮沸5min，然后添加氯化铵，搅拌均匀，再依次接种产朊假丝酵母菌种子液和干酪乳杆菌种子液，温度为28-32℃，以200rpm震荡培养12h，然后静置培养24h，得到产朊假丝酵母菌和干酪乳杆菌的发酵菌液；

步骤2）制备水华鱼腥藻液：将处于对数生长期的水华鱼腥藻按照10％的接种量接种到BG11培养基中进行培养，培养的条件为：光照强度5000lux，25℃培养，光暗比为12:12，通气速率为0.2vvm；培养48h，收集藻液；

步骤3）母液处理：将苏氨酸母液排到反应池中，然后铺设无纺布作为附着载体，再将发酵菌液接种到反应池中，处理时间为2-3d，然后将藻液接种到反应池中，继续处理6-7d，板框过滤收集微生物，然后排出液体，用于田间灌溉；

步骤4）分离提取蛋白：将微生物置于80℃烘干，然后粉碎机粉碎成粉末，再添加到5倍重量的稀盐酸中，搅拌均匀，再静置1h，然后投入到高速剪切机中进行剪切，得到微生物悬液，加热至90℃，保温条件下，水解6h，自然降温至室温，1000rpm离心3min，去除沉淀物，将水解液经多效蒸发器蒸发制得膏状物，最后将膏状物经喷雾造粒干燥制成蛋白粉。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤1）中，氯化铵的添加量占苏氨酸母液的0.5-1%重量份。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤1）中，所述产朊假丝酵母菌种子液和干酪乳杆菌种子液的接种量均为5-10%。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤3）中，所述发酵菌液的接种量为1-2%。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤3）中，所述藻液的接种量为0.5-1%。

7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤1）中，所述产朊假丝酵母菌种子液的制备方法为：将产朊假丝酵母菌接种到YPD液体培养基中进行培养，获得产朊假丝酵母菌种子液。

8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤1）中，所述干酪乳杆菌种子液的制备方法为：将干酪乳杆菌接种到MRS液体培养基中进行培养，获得干酪乳杆菌种子液。

9.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤4）中，所述稀盐酸的浓度为0.5mol/L。

10.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤4）中，所述高速剪切机的速度剪切为10000rpm，剪切时间为180s。