[发明专利]一种多糖基脂质纳米粒子的制备方法

说明书

本发明公开了一种多糖基脂质纳米粒子的制备方法，涉及纳米粒子制备领域，本发明通过水溶性多糖、单体、交联剂聚合交联反应得到多糖基纳米粒子，再以此为框架诱导脂质小分子在其表面自组装形成多糖基脂质纳米粒子，进一步与基因混合制备载基因多糖基脂质纳米粒子；或者先将多糖基纳米粒子与药物混合制备载药多糖基纳米粒子，再以此为框架诱导脂质小分子在其表面自组装形成载药多糖基脂质纳米粒子，进一步与基因混合制备载药和基因的多糖基脂质纳米粒子。本制备方法绿色、无污染、产量高，合成高效便捷，所制备得到的纳米粒子粒径均一，转染效率高，不易被肿瘤细胞泵出，在肿瘤治疗领域具有广阔应用前景。

技术领域

本发明涉及纳米粒子制备领域，尤其涉及一种多糖基脂质纳米粒子的制备方法。

背景技术

化学药物治疗是肿瘤治疗最为普遍的方法，但其面临以下不足之处：使用化学药物时，容易使肿瘤细胞产生耐药性，肿瘤耐药性是导致肿瘤化疗失败的重要原因之一；同时，由于化学药物对肿瘤的选择性不强，除对肿瘤细胞产生杀伤作用外，还会对正常组织造成很大的伤害。因此，如何克服肿瘤的耐药性并减少肿瘤化疗的副作用是目前肿瘤治疗面临的一个重要问题。

纳米颗粒由于其特定的纳米尺度，可通过EPR效应被动靶向到肿瘤部位，因此是抗肿瘤药物载体首选。纳米粒子能够通过细胞膜进入细胞，能够负载和保护化疗药物或基因进入细胞并在细胞内释放，提高运送效率和生物利用度。因而纳米尺度的粒子被视为控制释放抗肿瘤药物，达到其在肿瘤部位靶向富集的有力手段之一。因此设计适当途径构筑能够高效输运抗肿瘤药物的纳米载体成为肿瘤治疗中的关键环节。

现有技术表明，肿瘤耐药性多与P-糖蛋白的过表达相关。P-糖蛋白位于细胞膜上，是一个常见的保护细胞免受外来有害分子入侵的分子泵，然而肿瘤细胞中P-糖蛋白的过表达却使得多数药物或载体不易进入细胞或容易被“泵出”细胞而减小细胞内的停留时间，严重降低了治疗效果。

因此，本领域的技术人员致力于开发一种多糖基脂质纳米粒子的制备方法，通过该方法能够得到更高效的进入肿瘤细胞并不容易被泵出的多糖基脂质纳米粒子。

发明内容

有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是如何制备一种更高效的进入肿瘤细胞并不容易被泵出的纳米粒子。

为实现上述目的，本发明提供了一种多糖基脂质纳米粒子的制备方法，在一个具体实施方式中，包括以下步骤：

1.1制备水溶性多糖的水溶液，在惰性气体保护下加入引发剂，搅拌混匀；

1.2加入单体或溶于溶剂的单体，搅拌混匀；

1.3加入交联剂，惰性气体保护下进行聚合及交联反应；

1.4反应结束后透析处理，冷冻干燥得到多糖基纳米粒子；

1.5将两亲性脂质分子溶于溶剂，旋蒸除去溶剂，加水，超声，得到脂质分子混悬液；

1.6将步骤1.4得到的多糖基纳米粒子制备成水溶液，与步骤1.5得到的脂质分子混悬液混合，超声，得到多糖基脂质纳米粒子；或者将步骤1.4得到的多糖基纳米粒子制备成水溶液，与药物溶液混合，震荡，加水，震荡，超滤离心，用水清洗，得到载药多糖基纳米粒子，将得到的载药多糖基纳米粒子制备成水溶液，与步骤1.5得到的脂质分子混悬液混合，超声，得到载药多糖基脂质纳米粒子。

进一步地，上述方法还包括以下步骤：

1.7将步骤1.6得到的多糖基脂质纳米粒子或者载药多糖基脂质纳米粒子制备成水溶液，分别与基因水溶液混合，震荡，静置得到载基因多糖基脂质纳米粒子或者载药和基因的多糖基脂质纳米粒子。

进一步地，步骤1.1中的水溶性多糖为葡聚糖、氨基葡聚糖、壳聚糖、羟甲基壳聚糖、羧丙基壳聚糖、壳寡糖、海藻酸、水溶性淀粉、羧甲基葡聚糖，羧甲基纤维素、透明质酸、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素中的一种或多种。