[发明专利]一种受锈菌诱导的小麦启动子

说明书

本发明涉及基因工程技术领域，尤其是一种受锈菌诱导的小麦启动子，所述受锈菌诱导的小麦启动子核苷酸序列如下：cttcgcaggc acttggttca tatgttctga tagcagcttg caaactgacg gggaactgac aggcgcaggc ccttggggca attgtcctgg gtgcagcatg agtcaaaccg tcagaactga tggcacacga tcgtggcgct gtagtgccgg ctgaagcatt acttactgcc tcaaagctta ccgcacggga。长度为706bp，该启动因子进行运用到小麦的目的基因中，对小麦进行基因工程育种,增强了小麦抵抗防锈病的能力，有利于提高小麦的产量。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种受锈菌诱导的小麦启动子。

背景技术

启动子是位于结构基因5'端上游的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确的结合并具有转录起始的特异性。

起始时间和表达的程度。启动子就像“开关”，决定基因的活动。既然基因是成序列的核苷酸，那么启动子也应由DNA组成。启动子本身并不控制基因活动，而是通过与称为转录因子的这种蛋白质结合而控制基因活动的。转录因子就像一面“旗子”，指挥着酶的活动。这种酶制造着基因的RNA复制本。一般分为广谱表达型启动子、组织特异性启动子、肿瘤特异性启动子等多种形式。

在小麦进行种植时，会受锈病的侵扰，受害部位可因孢子积集而产生黄色、黑色或橙色小斑，尤其多黄色疱状斑。发生初期在叶和茎上出现浅黄色斑点，随着病害的发展，病斑数目增多，叶、茎表皮破裂，散发出黄色、橙色的夏抱子堆，影响小麦的收成，急需要一种受锈菌诱导的小麦启动子，防止小麦被锈病侵扰，影响产量。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术中存在的受锈菌诱导的小麦启动子缺点，而提出的一种受锈菌诱导的小麦启动子。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

设计一种受锈菌诱导的小麦启动子，所述受锈菌诱导的小麦启动子核苷酸序列如下：

优选的，所述受锈菌诱导的小麦启动子的制作步骤如下：

S1、变性：以小麦基因组为模板，模板DNA经加热至91℃-94℃，时间为3-5min，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；

S2、退火：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃-57℃，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；

S3、延伸：DNA模板与引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，并加入催化剂，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链；

S4、重复循环S1-S2-S3的过程，每完成一个循环需2～6min，共循环30-40次。

优选的，所述延伸的温度为72℃-75℃。

优选的，所述催化剂为Mg2+，所述Mg2+的浓度为1.5～2.0mmol/L。

优选的，所述TaqDNA聚合酶的浓度为50～200umol/L。

本发明提出的一种受锈菌诱导的小麦启动子，有益效果在于：通过把该启动子应用到小麦目的基因，增强了小麦的抗锈病的能力，有利于提高小麦的产量。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。

实施例1