[发明专利]一种受锈菌诱导的小麦启动子在审

专利信息
申请号: 201811581795.4 申请日: 2018-12-24
公开(公告)号: CN109679951A 公开(公告)日: 2019-04-26
发明(设计)人: 刘泉清;凌飞 申请(专利权)人: 武汉天问生物科技有限公司
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113
代理公司: 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 代理人: 冯子玲
地址: 430000 湖北省武汉市东湖新技术开发*** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 小麦 启动子 锈菌 诱导 防锈 基因工程技术 基因工程育种 核苷酸序列 目的基因 抵抗
【权利要求书】:

1.一种受锈菌诱导的小麦启动子,其特征在于,所述受锈菌诱导的小麦启动子核苷酸序列如下:

2.根据权利要求1所述的一种受锈菌诱导的小麦启动子,其特征在于,所述受锈菌诱导的小麦启动子的制作步骤如下:

S1、变性:以小麦基因组为模板,模板DNA经加热至91℃-94℃,时间为3-5min,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;

S2、退火:模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃-57℃,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;

S3、延伸:DNA模板与引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,并加入催化剂,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链;

S4、重复循环S1-S2-S3的过程,每完成一个循环需2~6min,共循环30-40次。

3.根据权利要求2所述的一种受锈菌诱导的小麦启动子,其特征在于,所述延伸的温度为72℃-75℃。

4.根据权利要求2所述的一种受锈菌诱导的小麦启动子,其特征在于,所述催化剂为Mg2+,所述Mg2+的浓度为1.5~2.0mmol/L。

5.根据权利要求2所述的一种受锈菌诱导的小麦启动子,其特征在于,所述TaqDNA聚合酶的浓度为50~200umol/L。

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