[发明专利]一种受锈菌诱导的小麦启动子在审
| 申请号: | 201811581795.4 | 申请日: | 2018-12-24 |
| 公开(公告)号: | CN109679951A | 公开(公告)日: | 2019-04-26 |
| 发明(设计)人: | 刘泉清;凌飞 | 申请(专利权)人: | 武汉天问生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113 |
| 代理公司: | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人: | 冯子玲 |
| 地址: | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开发*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 小麦 启动子 锈菌 诱导 防锈 基因工程技术 基因工程育种 核苷酸序列 目的基因 抵抗 | ||
1.一种受锈菌诱导的小麦启动子,其特征在于,所述受锈菌诱导的小麦启动子核苷酸序列如下:
2.根据权利要求1所述的一种受锈菌诱导的小麦启动子,其特征在于,所述受锈菌诱导的小麦启动子的制作步骤如下:
S1、变性:以小麦基因组为模板,模板DNA经加热至91℃-94℃,时间为3-5min,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
S2、退火:模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃-57℃,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
S3、延伸:DNA模板与引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,并加入催化剂,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链;
S4、重复循环S1-S2-S3的过程,每完成一个循环需2~6min,共循环30-40次。
3.根据权利要求2所述的一种受锈菌诱导的小麦启动子,其特征在于,所述延伸的温度为72℃-75℃。
4.根据权利要求2所述的一种受锈菌诱导的小麦启动子,其特征在于,所述催化剂为Mg2+,所述Mg2+的浓度为1.5~2.0mmol/L。
5.根据权利要求2所述的一种受锈菌诱导的小麦启动子,其特征在于,所述TaqDNA聚合酶的浓度为50~200umol/L。
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