[发明专利]一种强抗逆性鼠李糖乳杆菌A-4及其用途

说明书

本发明涉及一种具备强抗逆性的鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）A‑4，其保藏编号为CGMCC No.16550。本发明还涉及鼠李糖乳杆菌A‑4在制备饮料中的用途。本发明涉及的鼠李糖乳杆菌A‑4可耐受75℃高温，经pH 2.0酸处理2h存活率高达96.88%±1.4%；在4.5%NaCl的高渗透压胁迫、8倍培养基稀释的低营养胁迫、pH3.5酸胁迫、以及5~45℃温度胁迫下仍可生长繁殖，在制备常温活菌型乳酸菌饮料方面具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明属于生物技术领域。更具体地，本发明涉及一种强抗逆性鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）A-4，还涉及鼠李糖乳杆菌A-4的用途。

背景技术

乳酸菌是指可发酵碳水化合物产生大量乳酸的一类革兰氏染色阳性细菌的总称。乳酸菌具有调节胃肠道菌群平衡、抗乳糖不耐受症、促进蛋白和微量元素等营养物质的吸收、降血压、降血脂、增强机体免疫力、抗衰老延长寿命等功效，因此被广泛用于食品加工。

近年来,随着时代进步人们对于食品的需求发生迁跃，饮料已从过去的甘甜可口转向天然、营养和保健功能, 基于乳酸菌的发酵型饮料已经成为研究发展的重要方向。然而，乳酸菌发酵饮料需4℃冷链储运，且保质期短、活菌数下降快、感官不稳定等问题一直是行业的攻关瓶颈。

目前，针对上述问题CN108294109A、CN108094802A、CN106858260A、CN106550989A、CN106550991A、CN106417597A等发明公布了添加稳定剂、乳化剂、缓冲盐的改善方法。虽然在一定程度上提高了乳酸菌饮料稳定性，然而冷链储运、保质期过短的问题仍然没有解决。

乳酸菌活菌型饮料不稳定的核心问题在于产品的强酸性环境、储运温度、营养成分变化会直接影响其中添加菌株的生长繁殖。

因此，本发明以获得耐受强酸、低温、高温、低营养、高渗透等环境的强抗逆性菌株为攻关方向，在广泛采集特色样品、大量研究筛选的基础上完成了本发明。

发明内容

要解决的技术问题:本发明的目的是提供一种具备强抗逆性的鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）A-4。本发明的另一个目的是提供所述鼠李糖乳杆菌A-4的用途。

技术方案:本发明是通过下述技术方案实现的。

本发明第一方面涉及一种具有强抗逆性的鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）A-4，该菌株已于2018年9月29日在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，其保藏号为CGMCCNo.16550。

本发明所述的强抗逆性鼠李糖乳杆菌 A-4筛选过程如下。

（1）耐低温和耐高温乳酸菌的筛选。

采用常规方法从布基纳法索发酵大麦饮料、日本纪州腌渍菜、四川绵阳泡菜、云南大理乳扇、西藏那曲牧区曲拉中分离筛选出18株可15℃低温生长的乳酸菌；利用75℃不同时间高温胁迫处理的方法对它们进行了进一步耐高温筛选。

结果表明：5株乳酸菌可同时耐受高、低温胁迫，分别标记为A-4、B-32、E-9、J-18、L-13，其中菌株A-4耐受结果详见附图1。这些菌株均保藏于江苏恒康生物科技有限公司菌种保藏中心。

（2）耐酸乳酸菌的复筛。