[发明专利]一种雪旺细胞来源外泌体的用途、诱导剂和试剂盒有效

专利信息
申请号: 201811573938.7 申请日: 2018-12-21
公开(公告)号: CN109609456B 公开(公告)日: 2022-06-21
发明(设计)人: 王辉 申请(专利权)人: 首都医科大学附属北京潞河医院
主分类号: C12N5/079 分类号: C12N5/079;C12N5/0775
代理公司: 北京卓爱普专利代理事务所(特殊普通合伙) 11920 代理人: 王玉松
地址: 101149 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 细胞 来源 外泌体 用途 诱导剂 试剂盒
【权利要求书】:

1.雪旺细胞来源外泌体在诱导骨髓间充质干细胞分化为雪旺细胞中的应用。

2.一种诱导骨髓间充质干细胞分化为雪旺细胞的方法,其特征在于,所述方法为采用雪旺细胞来源外泌体诱导骨髓间充质干细胞分化为雪旺细胞。

3.如权利要求2所述的诱导骨髓间充质干细胞分化为雪旺细胞的方法,其特征在于,所述方法具体为:在含有对数生长期骨髓间充质干细胞的α-MEM培养液中加入雪旺细胞来源外泌体,换液后再加入雪旺细胞来源外泌体培养骨髓间充质干细胞,共换液3次,每次培养3天。

4.如权利要求2所述的诱导骨髓间充质干细胞分化为雪旺细胞的方法,其特征在于,所述方法具体为:取对数生长期的骨髓间充质干细胞用pH值为7.4的PBS清洗三遍,加入含有0.5-1.5mmβ-巯基乙醇的α-MEM培养液孵育24h,再用含体积分数为5%-15%FBS和30-40ng/mL全反式维甲酸的α-MEM培养液孵育3d,更换为原始分化培养液,同时添加180-220μg/mL的雪旺细胞来源外泌体,孵育7-8d,所述原始分化培养液以α-MEM培养液为基础,添加8-12ng/mL的FBS、4-6μM的佛司可林、8-12ng/mL的b-FGF、4-6ng/mL的PDGF和180-220ng/mL的HRG-β1。

5.如权利要求4所述的诱导骨髓间充质干细胞分化为雪旺细胞的方法,其特征在于,所述对数生长期的骨髓间充质干细胞由如下方法制得:将骨髓间充质干细胞加入到α-MEM完全培养液中制备浓度为4-6×107/ml的骨髓间充质干细胞悬液,取骨髓间充质干细胞悬液导入细胞培养瓶中,置于37℃、95%湿度和5%CO2浓度条件下孵育3天后,倾去α-MEM完全培养液,用pH值为7.4的PBS溶液清洗去除未贴壁的骨髓间充质干细胞,更换新的α-MEM完全培养液培养至细胞融合度为70%-80%。

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