[发明专利]普伐他汀联合ST6Gal-I沉默的细胞株在作为预防和治疗肝癌疾病药物中的应用

说明书

本发明属于医学技术领域，公开了普伐他汀联合ST6Gal‑I沉默的细胞株作为预防和治疗肝癌疾病药物中的应用。该普伐他汀能够降低ST6Gal‑I沉默的细胞株表面整合素(integrin‑α3和integrin‑β1)的表达，进而抑制了肿瘤细胞与血管内皮细胞的黏附；此外能抑制ST6Gal‑I沉默的MHCC‑97H细胞的迁移及侵袭。普伐他汀是通过调节PI3K/AKT/mTOR通路来降低整合素表达。本发明将为肝癌患者的诊断及治疗提供理论依据，同时为“老药新用”指导个体化临床化用药提供新思路，具有重要临床应用前景。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及他汀类药物在联合唾液酸酰基转移酶ST6GAL-I基因沉默抑制肝癌细胞黏附与迁移侵袭的相关研究。

背景技术

众所周知，恶性肿瘤是威胁人类健康和生命的只要疾病之一。2015年公布的全球癌症的最新统计结果显示，在全球最主要的致死癌症中，肝癌位于第二位。而中国肝癌的发病人数占全球肝癌患者人数的50％，超过90％的肝癌是肝细胞癌(Hepatocellularcarcinoma，HCC)。虽然手术切除和肝移植是潜在的治疗方法，但它们仍需面临肿瘤局部消融阶段的挑战。由于肝癌细胞本身独特的耐药性，从而使得化疗药物的选择受到局限；而针对肝癌的分子靶向治疗药物，索拉菲尼是多激酶抑制剂且已经进入III期临床试验，但不幸的是，在短时间进展中，肝癌迅速成为索拉菲尼耐药。因此，揭示肝癌耐药的发生发展机制不仅为进一步研究提供理论基础，而且对肝癌患者治疗、减少复发和改善预后具有现实意义，同时寻找新的肝癌治疗靶点成为迫切需求。

肝癌患者治疗的早期诊断指标是影响肝癌癌治疗效果的重要影响因素，但是，在寻找新的肝癌治疗靶点领域多数侧重于从传统膜蛋白出发，而忽略其可能是由于细胞蛋白糖基化修饰改变而造成细胞癌变。蛋白质的糖基化修饰主要包括N-连接糖基化、O-连接糖基化和糖基磷脂酰肌醇锚定连接。与核酸和蛋白质不同，糖链的合成过程并不遵循传统的基因信息传递的中心法则，主要由一系列催化糖苷键形成的糖基转移酶完成。生物体中超过50％的蛋白质存在糖基化修饰，肿瘤细胞表面的多种糖基化修饰如唾液酸化、岩藻糖基化等影响肿瘤细胞的增殖、侵袭与凋亡。糖基化是在酶的控制下，蛋白质或脂质附加上糖类的过程，发生于内质网。在糖基转移酶作用下将糖转移至蛋白质，和蛋白质上的氨基酸残基形成糖苷键。蛋白质经过糖基化作用，形成糖蛋白。蛋白质的糖基化可以通过影响新生肽链的空间结构，定位以及稳定性，从而参与到众多的生物学过程，如细胞识别与粘附、免疫应答、信号转导、受体活化等，而异常的糖基化修饰与炎症、损伤及肿瘤等疾病的发生发展过程有密切关系。

唾液酸是9-碳单糖衍生物，位于糖蛋白和糖脂的糖链末端，唾液酸化是糖基化修饰的一种，异常唾液酸化的形成是肿瘤细胞恶性转变的一个关键特征。唾液酰基转移酶主要有20种，分为ST3GalI–VI、ST6Gal-I，II、ST6GalNAcI–VI、ST8SIAI–VI四类。唾液酰基转移酶ST6Gal-I是特异性催化α2,6-连接中的唾液酸转移到N-聚糖链末端的唾液酰基转移酶。ST6Gal-I介导的α2，6唾液酸化在癌症进展中十分重要，已有研究表明，ST6GAL-I在多种肿瘤中呈现出高表达，比如胃癌，乳腺癌和宫颈癌。肿瘤细胞表面α2，6唾液酸的不同表达量可影响肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。然而目前，针对酰基转移酶ST6Gal-I在结合药物治疗方面的研究尚少。

他汀类药物即3-羟基-3甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制药，是目前最有效的降脂药物，不仅能强效地降低总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白，而且能一定程度上降低三酰甘油(TG)，还能升高高密度脂蛋白(HDL)，所以他汀类药物也可以称为较全面的调脂药。近年来，研究发现他汀类药物具有多方面非降脂作用，其中包括抑制动脉粥样硬化与血栓形成，还具有缓解器官移植后的排异反应、治疗骨质疏松症、抗肿瘤、抗炎作用、抗老年痴呆等多种作用。目前多数研究是围绕他汀类药物对肿瘤增殖力的影响，而对肿瘤黏附能力的影响未有明确报道，且造成肿瘤细胞黏附能力改变的分子机制更有待进一步探究。

发明内容