[发明专利]一种利巴韦林-白藜芦醇抗病毒偶联物、制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种利巴韦林‑白藜芦醇抗病毒偶联物、制备方法和应用。本发明所述偶联物由利巴韦林、连接臂和白藜芦醇组成。本发明所述利巴韦林‑白藜芦醇抗病毒偶联物以透明质酸为连接臂，引入亲水性药物利巴韦林和疏水性天然产物白藜芦醇，在水中自组装成纳米胶束，发挥联合抗病毒作用。相比较利巴韦林单一药物，疗效明显提高，副作用降低，可用于注射、口服给药。

技术领域

本发明属于药物制剂领域，涉及一种具有良好抗病毒活性和低毒性的利巴韦林-白藜芦醇偶联物，本发明还涉及该偶联物的制备和应用。

背景技术

利巴韦林是1972年由美国加州核酸研究所首先报道的，是一种有效的广谱抗病毒药物。其又名病毒唑，因结构又叫三氮唑核苷。它是单磷酸次黄嘌呤核苷(IMP)脱氢酶抑制剂，对多种病毒的DNR或RNA有抑制作用，还有抗肿瘤和免疫抑制作用。目前利巴韦林在临床上用于治疗甲型肝炎、由流行病毒A和B引起的流感、疱疹、腺病毒肺炎、麻疹等，也对乙型肝炎、丙型肝炎和人类免疫缺陷病毒等显示出较好的疗效。

利巴韦林自报道至今，已经发展成为一种成熟的抗病毒药物，但是其单一制剂长期使用引发的副作用仍是研究者关注的重点之一。研究表明，利巴韦林在体内蓄积会造成溶血，以及溶血性贫血，对于儿童和孕妇的伤害更加明显，有严重的致畸作用。因此，研究开发能够降低副作用，提高安全性和有效性的利巴韦林制剂是近几年研究的主要方向。

白藜芦醇又称芪三酚，属于二苯乙烯多酚类化合物，存在于多种植物中，由日本人在1939年从毛叶藜芦的根部提取分离得到。随后的研究报道中，显示白藜芦醇具有很广泛的生物功能，包括抗炎、抗肿瘤、抗氧化、保护心血管、免疫调节等。后续的深入研究又发现白藜芦醇还具有抗病毒的作用，能够有效抑制多种DNA、RNA病毒的感染。

透明质酸是D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺组成的双糖单位，又称糖醛酸，广泛存在于动物皮肤、软骨及结缔组织中。透明质酸在体内易降解，无毒副作用，安全性高，具有良好的生物相容性，目前在生物医药、组织工程以及高级化妆品等领域多有应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种利巴韦林-白藜芦醇抗病毒偶联物，由利巴韦林，连接臂和白藜芦醇组成，其中连接臂为天然含有羧基的多糖-透明质酸；白藜芦醇为反式白藜芦醇。

本发明的另一个目的是提供一种自组装纳米胶束体系，将利巴韦林和辅助抗病毒天然产物白藜芦醇能够起到协同抗病毒的作用。该体系可以在水中可以自组装，减少了有机溶剂和化学交联剂的大量使用，制备工艺简单，可行性高。

本发明的另一个目的是提供上述利巴韦林-白藜芦醇抗病毒偶联物的制备方法。

本发明的另一个目的是提供上述利巴韦林-白藜芦醇抗病毒偶联物在制药中的应用。

为达到上述目的，本发明提供一种利巴韦林-白藜芦醇抗病毒偶联物，该偶联物的连接臂为低分子量透明质酸，分子量为5000-200000Da，白藜芦醇为反式白藜芦醇。在透明质酸活化的羧基上共价接枝亲水性药物利巴韦林和疏水天然产物白藜芦醇，使其具有两亲性，在水介质中能自组装形成纳米胶束，达到协同抗病毒的作用。

所述的利巴韦林-白藜芦醇抗病毒偶联物的制备方法，包括下列步骤：

将透明质酸溶于反应溶剂中，加入一定量1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)，活化羧基。将利巴韦林和白藜芦醇溶于适当有机溶剂中，向其中加入4-二甲氨基吡啶(DMAP)，形成药物溶液；所述的药物溶液滴入活化后的透明质酸溶液中，进行羧基和羟基的缩合反应，除去溶剂和小分子，即得本发明利巴韦林-白藜芦醇偶联物。

所述制备方法中，透明质酸与EDC的摩尔比为1:2-6；透明质酸与EDC的反应时间为15-25h，反应过程中采用25℃-35℃水浴磁力搅拌；透明质酸与利巴韦林的摩尔比1:1-3；利巴韦林、白藜芦醇、DMAP的摩尔比为1:1:1；羧基和羟基的缩合反应时间为15-25h，反应温度为常温。