[发明专利]构建测序文库的方法、试剂盒、上机方法及测序数据的拆分方法

权利要求书

1.一种构建测序文库的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

多个分子标签接头组，每个所述分子标签接头组包括多个分子标签接头，每个所述分子标签接头包含分子标签序列，

多个I5-index引物序列及与多个所述I5-index引物序列对应的多个I7-index引物序列；

其中，任意两个所述分子标签接头上的所述分子标签序列不同、任意两个所述I5-index引物序列上的index不同，任意两个所述I7-index引物序列上的index不同。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，每个所述分子标签接头组中，所述分子标签接头的数量相等。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，每个所述分子标签接头以双链形式存在；优选以双链固定序列的形式存在。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，每个所述分子标签接头组包括8～30个分子标签接头；优选每个所述分子标签序列的长度为3～10nt。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述I5-index引物序列和所述I7-index引物序列各自分别有10～200条index。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的试剂盒，其特征在于，每个所述分子标签序列、每个所述I5-index引物序列上的index及每个所述I7-index引物序列上的index之间的编辑距离为2～4。

7.一种构建测序文库的方法，其特征在于，所述方法包括：

利用M个分子标签接头组对M个样本组DNA进行接头连接，得到连接产物，其中，每个所述样本组包含N个样本；

利用N条I5-index引物序列与N条I7-index引物序列对每个所述样本组中的N个所述样本的所述连接产物进行扩增，得到M*N个所述样本的测序文库；

其中，每个所述分子标签接头组包括多个分子标签接头，每个所述分子标签接头上带有分子标签序列，任意两个所述分子标签接头上的所述分子标签序列不同、任意两个所述I5-index引物序列上的index不同，任意两个所述I7-index引物序列上的index不同，

其中，M和N均为≥2的自然数，且N≥M，M*N个所述样本的测序文库中，任意两个所述样本的测序文库中至少如下之二存在不同：分子标签序列、I5-index引物序列上的index及I7-index引物序列上的index。

8.根据权利要求7所述的方法，其特在于，位于同一组所述分子标签接头组的所述样本中，任意两个所述样本的所述I5-index引物序列上的index不同，且所述I7-index引物序列上的index也不同。

9.根据权利要求7所述的方法，其特在于，位于不同的所述分子标签接头组的所述样本中，任意两个所述样本的所述I5-index引物序列上的index和/或所述I7-index引物序列上的index不同。

10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，每个所述分子标签接头组中，所述分子标签接头的数量相等；

优选地，每个所述分子标签接头以双链形式存在，更优选以双链固定序列的形式存在；

优选地，每个所述分子标签接头组包括8～30个分子标签接头；

优选地，每个所述分子标签序列的长度为3～10nt。

11.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述I5-index引物序列和所述I7-index引物序列各自分别有10～200条index。

12.根据权利要求7至11中任一项所述的方法，其特征在于，每个所述分子标签序列、每个所述I5-index引物序列上的index及每个所述I7-index引物序列上的index之间的编辑距离为2～4。