[发明专利]DNAH6基因突变体及其应用

说明书

本发明涉及精子头部异常疾病的标记物及其应用。更具体而言，本发明提供一种分离的编码DNAH6突变体的核酸，所述核酸与SEQ ID NO:1相比，具有以下突变中的一种或两种：c.2454A>T突变、c.7706G>A突变，本发明还提供编码所述核酸的多肽、所述核酸和多肽在精子头部异常检测中的用途和检测方法、以及由此制成的引物和试剂盒。本发明以无头精子合并圆头精子症一个核心家系为研究对象，对家系中的患病个体进行了全外显子组测序和比较，找到新的致病基因及突变位点，从而利用该致病基因和突变位点对精子头部异常疾病进行检测。

技术领域

本发明涉及医学检验领域，具体涉及一种DNAH6基因突变体及其应用。

背景技术

精子头部异常是一种隐性遗传的导致男性不育的畸形精子症，是一种罕见的遗传疾病，其主要临床特征涉及多种头部异常亚型，包括圆头精子症、大头精子症、无头精子症等亚型。无头精子症(acephalic spermatozoa)是精子没有头部或者头部与尾部之间连接松散。早期研究中也有文献称这个病为断头精子症(decapitated spermatozoa)、大头针状精子(pinhead sperm)。国际早期的分子发病机制研究发现SUN5或TSGA10基因发生了突变(1-2)。圆头精子症(globozoospermia)是指精子头部呈圆形，通常无顶体。以往分子遗传学研究发现DPY19L2基因突变会导致圆头精子症(3)。但迄今为止国际上很少报道一个患者同时患无头合并圆头精子症。

目前无头合并圆头精子症的基因突变谱尚未发现，基因型和表现型的关系也不明确。目前单基因疾病的研究开始大量采用全外显子组测序(whole-exome sequencing)及全基因组测序(whole-genome sequencing)的方法，这两种方法被成功的应用于发现稀有单基因疾病的致病基因。全外显子组测序及全基因组测序技术已被证明为降低稀有单基因疾病候选基因甚至发现其致病基因的有力、有效手段。仅通过对几个很少的个体(包括患者及正常对照)的全外显子组或基因组进行测序来筛选与疾病相关的变异，其成功率大为提升。

因此本领域对无头合并圆头精子症的研究尚不清晰，对造成该疾病的原因更不明了，因此本领域迫切需要对无头合并圆头精子症的致病机理进行研究，找到致病基因及突变位点。

发明内容

本发明通过全外显子组测序的方法确定了无头合并圆头精子症的致病新基因。

根据本发明，提供一种无头合并圆头精子症的生物标记物，所述生物标记物为突变的DNAH6基因或DNAH6蛋白，所述生物标记物是具有选自如下的突变的DNAH6基因或DNAH6蛋白：

在外显子15中错义突变(c.2454A>T；p.E818D)；

在外显子48中错义突变(c.7706G>A；p.R2569H)。

本发明提供一种分离的编码DNAH6突变体的核酸，其特征在于，所述核酸与SEQ IDNO:1相比，具有以下突变中的一种或两种：c.2454A>T突变、c.7706G>A突变。

其中，所述多肽为DNAH6突变体，所述多肽与SEQ ID NO:2相比，具有以下突变中的一种或两种：p.E818D突变、p.R2569H突变。

其中，具有p.E818D突变的DNAH6突变体是由具有c.2454A>T突变的DNAH6突变基因编码，具有p.R2569H突变的DNAH6突变体是由具有c.7706G>A突变的DNAH6突变基因编码。

本发明还提供一种编码DNAH6突变体的核酸在精子头部异常检测中的用途，其中，通过检测所述核酸在采集自受试者的生物样品中是否存在来判断所述受试者是否易患精子头部异常，其中，所述核酸与SEQ ID NO:1相比，具有以下突变中的一种或两种：c.2454A>T突变、c.7706G>A突变。