[发明专利]固定化锌离子亲和层析材料及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种固定化锌离子亲和层析材料的制备方法，所述固定化锌离子亲和层析材料以琼脂糖为固相载体、亚氨基二乙酸为螯合剂，锌离子为配体，所述方法包括活化琼脂糖并螯合Zn²⁺，其中，活化琼脂糖的过程包括琼脂糖分子在NaBH₄-NaOH溶液中接枝环氧基丙基，然后依次经蒸馏水、第一NaHCO₃-Na₂CO₃缓冲液淋洗，并分别在第二NaHCO₃-Na₂CO₃缓冲液和NaBH₄-Na₂CO₃溶液中先后两次接枝-N-(CH₂COOH)₂基团，所述-N-(CH₂COOH)₂基团来源于亚氨基二乙酸溶液，所述亚氨基二乙酸溶液的pH值为6.5-6.8，分别在第二NaHCO₃-Na₂CO₃缓冲液和NaBH₄-Na₂CO₃溶液中先后两次接枝-N-(CH₂COOH)₂基团时，第二NaHCO₃-Na₂CO₃缓冲液与亚氨基二乙酸溶液的体积比为1:0.5-0.8；NaBH₄-Na₂CO₃溶液与亚氨基二乙酸溶液的体积比为1：0.2-0.5，所述NaBH₄-Na₂CO₃溶液中，Na₂CO₃溶液的浓度为0.1-0.5mol/L，NaBH₄的浓度为0.1-0.25 mg/mL，所述第二NaHCO₃-Na₂CO₃缓冲液的pH为9.0-9.5。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述NaBH₄-NaOH溶液中，NaOH溶液的浓度为1.5-2 mol/L，NaBH₄的浓度为0.5-1 mg/mL。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述NaOH溶液的浓度为1.5 mol/L，NaBH₄的浓度为0.5 mg/mL。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述第一NaHCO₃-Na₂CO₃缓冲液的pH为8.0-8.5。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述第一NaHCO₃-Na₂CO₃缓冲液的pH为8.5。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述第二NaHCO₃-Na₂CO₃缓冲液的pH为9.0。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述环氧基丙基来自环氧基氯丙烷，所述琼脂糖、环氧基氯丙烷与NaBH₄-NaOH溶液的体积比为1：0.2-0.4：0.5-1。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述琼脂糖、环氧基氯丙烷与NaBH₄-NaOH溶液的体积比为1：0.3：0.5。

9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述亚氨基二乙酸溶液的pH值为6.8。